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文檔簡介
1、目的:通過建立阿霉素(ADR)腎病腎硬化動(dòng)物模型,研究尿毒清對(duì)腎臟功能、腎臟病理及腎纖維化相關(guān)因子TGFB、TIMP-1等表達(dá)的影響,探討尿毒清對(duì)阿霉素腎病大鼠腎纖維化的保護(hù)作用及其可能機(jī)制。
方法:
(1)雄性SD大鼠48只,隨機(jī)分為四組,1)正常組(N組)12只;2)阿霉素腎病腎硬化模型組(M組)12只;3)尿毒清治療組(NDQ組)12只;4)貝那普利治療組(B組)12只。后三組大鼠行左腎切除術(shù),術(shù)后7天
2、給予單次ADR5mg·kg-1尾靜脈注射,術(shù)后30天給予重復(fù)尾靜脈注射ADR3mg·kg-1,N組同時(shí)給予等量生理鹽水尾靜脈注射。首次尾靜脈注射ADR后,NDQ組每天用尿毒清3g·kg-1灌胃,B組每天用貝那普利4mg·kg-1灌胃,N組、M組每天用等量生理鹽水灌胃。4組于用藥4周后、8周后各處死6只大鼠,腹主動(dòng)脈取血,留取腎組織標(biāo)本。
(2)觀察用藥4、8周后4組大鼠24h尿蛋白定量、血尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)
3、、血白蛋白(ALD)、血甘油三脂(TG)、血膽固醇(CHO)的水平。(3)觀察用藥4、8周后4組大鼠電鏡下腎臟病理變化,用藥8周后4組大鼠光鏡下腎臟病理變化,免疫組化采用SABC法檢測腎組織骨調(diào)素(OPN)、纖連蛋白(FN)、α肌動(dòng)蛋白(α-SMA)、膠原蛋白Ⅳ(COLIV),應(yīng)用RT-PCR方法檢測腎皮質(zhì)轉(zhuǎn)化生長因子β(TGFβ1)mRNA、組織性金屬蛋白酶抑制物1(TIMP-1)mRNA、骨調(diào)素(OPN)mRNA、纖溶酶原激活物抑制
4、劑-1(PAI-1)mRNA的表達(dá)。
結(jié)果:
(1)各組24h尿蛋白定量、血BUN、SCr、TG、Cho、Alb變化與N組相比,M組、B組、NDQ組24h尿蛋白定量、血BUN、SCr、TG、CHO明顯升高(P<0.01),血Alb明顯降低(P<0.01),與M組比較,B組、NDQ組24h尿蛋白定量、血BUN、SCr、TG、CHO明顯降低(P<0.01),血Alb明顯升高(P<0.01)。
(2)
5、腎組織病理改變光鏡下N組結(jié)構(gòu)基本正常,M組腎小球系膜細(xì)胞及內(nèi)皮細(xì)胞球性增生,伴毛細(xì)血管袢局灶節(jié)段性塌陷,球囊粘連,系膜細(xì)胞中度增生,系膜基質(zhì)區(qū)擴(kuò)大,毛細(xì)血管腔狹窄,部分腎小球出現(xiàn)節(jié)段性硬化。B組、NDQ組纖維化程度明顯輕。電鏡下N組結(jié)構(gòu)基本正常,M組系膜增生,基膜外足突明顯缺失,濾過膜結(jié)構(gòu)不完整,足細(xì)胞突起少見,B組、NDQ組病變明顯輕。
(3)免疫組化B組、NDQ組、和N組中OPN、FN、α-SMA、COLIV的表達(dá)明顯
6、低于M組(P<0.01);RT-PCR顯示B組、NDQ組、N組中TGFβ1mRNA、TIMP-1mRNA、OPNmRNA、PAI-1mRNA的表達(dá),均較M組降低(P<0.01)。
結(jié)論:尿毒清可明顯減少蛋白尿的排泄,糾正脂代謝紊亂,改善低蛋白血癥,降低血尿素氮和肌酐,同時(shí)加強(qiáng)FN、COL-Ⅳ的降解,減少OPN、α-SMA的表達(dá),下調(diào)腎組織TGFβ1mRNA、TIMP-1mRNA、OPNmRNA、PAI-1mRNA的表達(dá),抑
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