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1、 A Dissertation Submitted in Partial Fulfillment of the Requirements for the Degree of Master of Medicine Experimental study of domestic new drugs Icotinib Hydrochloride Tablets with three kinds of cell lines of nasophar
2、yngeal carcinoma on the proliferation Graduate Student: Fei Wei Major: Oncology Supervisor: Prof. Xinhua Xu China Three Gorges University Yichang, 443003, P.R.China March, 2015 三 峽 大
3、 學(xué) 碩 士 學(xué) 位 論 文 內(nèi) 容 摘 要 目的:通過觀察國(guó)產(chǎn)新藥凱美納處理鼻咽上皮細(xì)胞株 NP-69 及鼻咽癌細(xì)胞株CNE-1、CNE-2、SUNE-1 后觀察細(xì)胞的凋亡情況及細(xì)胞 EGFR 的表達(dá)情況,了解凱美納對(duì)鼻咽癌細(xì)胞株增殖的影響,并進(jìn)一步探討藥物作用的可能機(jī)制。 方法:(1)MTT法檢測(cè)凱美納處理細(xì)胞后的細(xì)胞增殖及凋亡情況,選擇最適作用濃度和作用時(shí)間。(2)FCM檢測(cè)凱美納作用于鼻咽癌細(xì)胞株后的細(xì)胞凋亡和細(xì)胞
4、周期分布情況。 (3) WB檢測(cè)凱美納處理鼻咽癌細(xì)胞后的EGFR表達(dá)情況。 (4) ARMS檢測(cè)凱美納處理細(xì)胞后的EGFR基因突變情況。 結(jié)果:(1)凱美納對(duì)鼻咽癌細(xì)胞株的增殖具有抑制作用,其最適作用濃度為0.3umol/L。凱美納對(duì)細(xì)胞株增殖的抑制作用在24h較6h、12h明顯。(2)凱美納處理各細(xì)胞株后,CNE-2細(xì)胞株的凋亡比例明顯高于其他細(xì)胞株,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。(3)凱美納可使阻滯于CNE-2細(xì)胞G0/G1期。(4)凱美納處理各
5、細(xì)胞株后,CNE-2細(xì)胞株EGFR表達(dá)明顯高于其他細(xì)胞株。 (5)ARMS檢測(cè)發(fā)現(xiàn)EGFR基因陽(yáng)性突變位于19Del與21L858R。 結(jié)論:凱美納對(duì)鼻咽癌各細(xì)胞株均具有抑制作用,以對(duì)CNE-2細(xì)胞株的增殖抑制作用最強(qiáng);凱美納處理各細(xì)胞株后,CNE-2細(xì)胞的凋亡明顯增加,細(xì)胞阻滯于G0/G1期;而研究發(fā)現(xiàn)EGFR在CNE-2細(xì)胞株中呈高水平表達(dá),且檢測(cè)到鼻咽癌細(xì)胞株中EGFR基因陽(yáng)性突變主要位于19Del與21L858R。本研究結(jié)果顯示
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