補中益氣湯“益氣升陽”配伍治療脾虛泄瀉大鼠的作用機制研究.pdf

1、目的:
　　補中益氣湯出自李東垣《脾胃論》，為益氣升陽法代表方，是臨床上治療脾虛泄瀉證的常用處方。本實驗基于病理組織及營養(yǎng)物質(zhì)吸收的角度，復(fù)制脾虛泄瀉證動物模型，探討脾虛泄瀉的發(fā)生及其發(fā)生葡萄糖吸收障礙可能的作用機制;并通過補中益氣湯“益氣升陽”各配比組方進行干預(yù)，明確補中益氣湯中益氣升陽配比“黃芪-升麻、柴胡”的最佳用量。通過實驗研究挖掘其科學(xué)內(nèi)涵，為臨床醫(yī)家運用該方起指導(dǎo)作用。
　　方法:
　　1.補中益氣湯益氣升

2、陽配比組方對脾虛泄瀉大鼠的影響
　　通過多因素法“五味偏食+游泳力竭+控制飲食”建立脾虛泄瀉大鼠模型，造模完成后，隨機分成補中益氣湯組、補中益氣湯倍“升麻-柴胡”組及補中益氣湯去“升麻-柴胡”組，分別予以相對應(yīng)的藥物進行干預(yù)，考察大鼠體重、宏觀積分、胸腺指數(shù)及脾臟指數(shù)。
　　2.補中益氣湯益氣升陽配比組方對脾虛泄瀉大鼠小腸粘膜修復(fù)的影響
　　通過多因素法“五味偏食+游泳力竭+控制飲食”建立脾虛泄瀉大鼠模型，造模完成后，

3、隨機分成補中益氣湯組、補中益氣湯倍“升麻-柴胡”組及補中益氣湯去“升麻-柴胡”組，分別予以相對應(yīng)的藥物進行干預(yù)，通過光鏡下觀察小腸絨毛結(jié)構(gòu)，并運用醫(yī)學(xué)影像分析系統(tǒng)測量小腸絨毛高度及寬度，以及透射電鏡觀察小腸微絨毛結(jié)構(gòu)。
　　3.補中益氣湯益氣升陽配比組方對脾虛泄瀉大鼠葡萄糖轉(zhuǎn)運體GLUT2相關(guān)基因表達的影響
　　通過多因素法“五味偏食+游泳力竭+控制飲食”建立脾虛泄瀉大鼠模型，造模完成后，隨機分成補中益氣湯組、補中益氣湯倍“

4、升麻-柴胡”組及補中益氣湯去“升麻-柴胡”組，分別予以相對應(yīng)的藥物進行干預(yù)后提取小腸粘膜總RNA，運用RT-PCR法檢測葡萄糖轉(zhuǎn)運吸收相關(guān)基因GLUT2、Na+-K+-ATPase、T1R2+T1R3、Cav1.3、PKC-β-Ⅱ亞型基因的表達。
　　成果:
　　1.體重、宏觀積分及胸腺、胰臟指數(shù):模型組大鼠體重明顯下降，宏觀積分明顯上升(P＜0.05)。胸腺指數(shù)及脾臟指數(shù)明顯下降(P＜0.05);補中益氣湯組體重、胸腺指數(shù)

5、、脾臟指數(shù)均明顯上升，宏觀積分下降(P＜0.05)。而其他兩組一些指標(biāo)上改變不明顯。(P＞0.05)
　　2.病理學(xué)檢測:模型組大鼠小腸絨毛形態(tài)破壞，炎癥細胞浸潤，上皮細胞缺失;細胞器破壞，小腸絨毛的高度及寬度均明顯降低(P＜0.01)。經(jīng)補中益氣湯干預(yù)后補中益氣湯組小腸粘膜修復(fù)明顯，絨毛的高度及寬度均可見升高(P＜0.01)。而倍“升麻-柴胡”組及去“升麻-柴胡”組病理學(xué)上改變不明顯(P＞0.05)。
　　3.葡萄糖轉(zhuǎn)運吸

6、收相關(guān)基因:模型組腸道粘膜GLUT2、Na+-K+-ATP酶、PKC-β-Ⅱ亞型表達量明顯降低(P＜0.05)。TIR2、T1R3及Cav1.3表達量亦明顯降低(P＜0.05)。經(jīng)補中益氣湯不同配比組方干預(yù)后，各組脾虛泄瀉大鼠模型基因表達均有所升高。其中，補中益氣湯原方組，各基因的表達量均明顯升高(P＜0.01)。而倍“升麻-柴胡”組及去“升麻-柴胡”組升高不明顯(P＞0.05)。
　　結(jié)論:
　　脾虛泄瀉大鼠一般狀態(tài)變化、

7、體重、胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)下降;小腸絨毛損傷;腸道粘膜葡萄糖轉(zhuǎn)運吸收相關(guān)基因表達下降，從而證實了脾虛泄瀉的發(fā)生與葡萄糖吸收障礙相關(guān)，且與腸道粘膜上PKC-β-Ⅱ—GLUT2—TIR2、T1R3/Cav1.3通道密切相關(guān)。而補中益氣湯通過改善小腸粘膜，提升該通道基因表達，從而達到治療脾虛泄瀉;其中，尤以補中益氣湯原方配伍為最佳，進一步證實了補中益氣湯益氣升陽的配伍應(yīng)當(dāng)為益氣藥與升陽藥共用，并且大劑量的益氣藥與小劑量的升陽藥的配伍更能體現(xiàn)其益