2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、南開(kāi)大學(xué)學(xué)位論文使用授權(quán)書 本人完全了解《南開(kāi)大學(xué)關(guān)于研究生學(xué)位論文收藏和利用管理辦法》關(guān)于南開(kāi)大學(xué)(簡(jiǎn)稱“學(xué)?!?研究生學(xué)位論文收藏和利用的管理規(guī)定,同意向南開(kāi)大學(xué)提交本人的學(xué)位論文電子版及相應(yīng)的紙質(zhì)本,并委托印刷存檔論文。 本人了解南開(kāi)大學(xué)擁有在《中華人民共和國(guó)著作權(quán)法》規(guī)定范圍內(nèi)的學(xué)位論文使用權(quán),同意在以下幾方面向?qū)W校授權(quán)。即: 1.學(xué)校將學(xué)位論文編入《南開(kāi)大學(xué)博碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù)》,并作為資料在學(xué)校圖書館等場(chǎng)所提供閱覽,在校

2、園網(wǎng)上提供論文目錄檢索、文摘以及論文全文瀏覽、下載等信息服務(wù); 2.學(xué)??梢圆捎糜坝 ⒖s印或其他復(fù)制手段保存學(xué)位論文;學(xué)校根據(jù)規(guī)定向教育部指定的收藏和存檔單位提交學(xué)位論文; 3.非公開(kāi)學(xué)位論文在解密后的使用權(quán)同公開(kāi)論文。 4.同意學(xué)校將本人向有關(guān)電子出版單位授權(quán)的學(xué)位論文(含電子版和授權(quán)書)轉(zhuǎn)交相關(guān)授權(quán)單位。 本人承諾:本人的學(xué)位論文是在南開(kāi)大學(xué)學(xué)習(xí)期間創(chuàng)作完成的作品,并已通過(guò)論文答辯;提交的學(xué)位論文電子版與紙質(zhì)本論文的內(nèi)容一致,如因不

3、同造成不良后果由本人自負(fù)。 本人簽署本授權(quán)書一份,交圖書館留存。 學(xué)位論文作者暨授權(quán)人(親筆)簽字: 葛令苗 2015 年 5 月 26 日 南開(kāi)大學(xué)研究生學(xué)位論文作者信息 論 文 題 目 論 文 題 目 重組人表皮生長(zhǎng)因子的表達(dá)純化及其凝膠劑的制備 重組人表皮生長(zhǎng)因子的表達(dá)純化及其凝膠劑的制備 姓 名 姓 名 葛令苗 葛令苗 學(xué)號(hào) 學(xué)號(hào) 2120120961 2120120961 答 辯 日

4、 期 答 辯 日 期 2 0 1 5 2 0 1 5 年 5 5 月 2 0 2 0 日 論 文 類 別 論 文 類 別 博士 博士 □ 學(xué)歷碩士 學(xué)歷碩士 √ 專業(yè)學(xué)位碩士 專業(yè)學(xué)位碩士 □ 同等學(xué)力碩士 同等學(xué)力碩士 □ 劃 √ 選 擇 選 擇 學(xué) 院 學(xué) 院 ( 單 位 單 位 ) 生命科學(xué)學(xué)院 生命科學(xué)學(xué)院 學(xué) 科 學(xué) 科 / 專 業(yè) 專 業(yè) ( 專 業(yè) 學(xué) 位 專 業(yè) 學(xué) 位

5、 ) 名 稱 名 稱 生物化學(xué)與分子生物學(xué) 生物化學(xué)與分子生物學(xué) 聯(lián) 系 電 話 聯(lián) 系 電 話 13821352729 13821352729 電 子 郵 箱 電 子 郵 箱 gelingmiao@163.com gelingmiao@163.com 通信地址 通信地址(郵編 郵編): 天津市南開(kāi)區(qū)衛(wèi)津路 天津市南開(kāi)區(qū)衛(wèi)津路 94 94 號(hào) 南開(kāi)大學(xué)( 南開(kāi)大學(xué)(300071 300071) 非 公 開(kāi) 論 文 編 號(hào) 非 公 開(kāi)

6、 論 文 編 號(hào) 備 注 備 注 注:本授權(quán)書適用我校授予的所有博士、碩士的學(xué)位論文。由作者填寫一份并簽字后交校圖書館,如已批準(zhǔn)為非公開(kāi)學(xué)位論文,須附批準(zhǔn)通過(guò)的《南開(kāi)大學(xué)研究生申請(qǐng)非公開(kāi)學(xué)位論文審批表》和“非公開(kāi)學(xué)位論文標(biāo)注說(shuō)明”頁(yè)。 摘要 I 摘要 摘要 表皮生長(zhǎng)因子 (表皮, 生長(zhǎng)因子, EGF) 是一種低分子量的多肽類細(xì)胞因子,能促進(jìn)機(jī)體多種細(xì)胞的增殖;對(duì)治療角膜損傷、神經(jīng)損傷,加快胃腸道潰瘍和體表創(chuàng)傷的愈合都有很高的臨床應(yīng)用

7、價(jià)值;研究發(fā)現(xiàn)惡性腫瘤細(xì)胞中的表皮生長(zhǎng)因子異常增加,因而 EGF 也可以作為抗腫瘤的靶點(diǎn);在化妝品領(lǐng)域,添加了EGF 的化妝品可以促進(jìn)膠原蛋白的合成,活化皮膚細(xì)胞,對(duì)延緩細(xì)胞衰老起到很好的效果。 為了簡(jiǎn)單高效的獲得 EGF,本論文設(shè)計(jì)并實(shí)施了創(chuàng)新的融合表達(dá)與純化策略。 首先本文人工合成編碼 EGF 的基因, 并在其前端加入編碼 DDDDK 序列 (腸激酶識(shí)別位點(diǎn):-(Asp)4-Lys-) ,插入到 pET-GST-3C 載體上,獲得大

8、腸桿菌 EGF融合表達(dá)系統(tǒng)。經(jīng) IPTG 誘導(dǎo)表達(dá),高壓破碎菌體,包涵體復(fù)性,EGF 融合蛋白GST 親和層析純化,腸激酶切去標(biāo)簽蛋白,并進(jìn)一步經(jīng)過(guò) 10 kD 的超濾膜分離純化獲得 EGF 粗品。最后再經(jīng) HPLC 分離制備 EGF,純度高達(dá) 95.41%。經(jīng)過(guò)蛋白電泳鑒定為 6.0 kD, 與預(yù)期一致。 紫外光譜掃描儀掃描, 最大吸收峰在 270 nm。經(jīng)計(jì)算,重組 EGF 的產(chǎn)量為 53.056 mg/L。 其次,鑒于腸激酶切割融

9、合蛋白具有高度專一性和切割效率高的優(yōu)點(diǎn),本文優(yōu)化了畢赤酵母分泌表達(dá)腸激酶的條件: 甲醇濃度為 1.5 %、 誘導(dǎo)溫度為 27 ℃、誘導(dǎo)時(shí)間為 100 h, 得到腸激酶的酶活為 30.10 IU/mL。 經(jīng)計(jì)算一個(gè)酶活單位最終酶切 2.28 μgEGF 融合蛋白。 凝膠劑生物相容性優(yōu)良, 能發(fā)揮持續(xù)的藥物釋放效果。 最后本文優(yōu)化了 EGF凝膠劑的成分配方, 其最佳計(jì)量為焦亞硫酸鈉 0.10 g, 乙二胺四乙酸二鈉 0.01 g,甘油 5

10、g, 卡波姆基質(zhì) 1.00 g 溶脹、 三乙醇胺約 1.35 g 中和成透明凝膠、 加入 2 mL含有 1.0 mgEGF 的溶液,攪拌均勻后加注射用水至 100 g。所制備的凝膠劑可以成功釋放 EGF,能促進(jìn)小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(Balb/c3T3)的增殖,經(jīng)測(cè)定生物活性為 6.32 x 105 IU(1.0 mg)/100g。 國(guó)內(nèi)關(guān)于 EGF 的研究, 大多是融合表達(dá)重組 EGF, 對(duì)獲得 EGF 融合表達(dá)純化的報(bào)道較少,加之市場(chǎng)上

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