乳桿菌對(duì)高脂膳食誘導(dǎo)小鼠肥胖形成抑制作用及機(jī)制研究.pdf

1、肥胖與高血脂、糖尿病等代謝綜合征密切相關(guān)，已經(jīng)成為全球公共健康問題。肥胖的發(fā)生與很多因素相關(guān)，其中長期的高脂膳食是引起肥胖的一個(gè)重要因素。由于藥物及手術(shù)等控制體重會(huì)引起一些副作用，因此，在食品科學(xué)領(lǐng)域，尋求治療高脂膳食引起的肥胖受到廣泛關(guān)注。益生菌作為一種對(duì)人體健康有益的活的微生物，現(xiàn)如今被用于治療肥胖的一種手段。然而益生菌治療肥胖的機(jī)制尚不明確，需要進(jìn)一步研究。
　　本課題擬從三株乳酸菌中篩選出對(duì)高脂膳食誘導(dǎo)Balb/c小鼠肥胖

2、有明顯抑制作用的益生菌株，研究其對(duì)肥胖小鼠肝臟的影響；探究肥胖小鼠腸道菌群變化及脂肪因子的改變，進(jìn)而推斷乳桿菌抑制小鼠肥胖形成的機(jī)制。開發(fā)出具有減少機(jī)體脂肪沉積的專用益生菌產(chǎn)品，為肥胖的預(yù)防和控制提供新的思路。
　　給高脂膳食Balb/c小鼠以108及109CFU/mL劑量灌胃由本實(shí)驗(yàn)室分離鑒定得到的Lactobacillus paracaseisubsp.ParacaseiM5(M5),Lactobacillus paracas

3、ei subsp.ParacaseIX12(X12),Lactobacillus coryniformissubsp.torquensT3(T3)三株乳桿菌，6周末，M5及T3顯著降低小鼠體重，體脂率及Lee’s指數(shù)（P<0.05），并且呈現(xiàn)出劑量依賴性。通過測定小鼠血清甘油三酯（TG），總膽固醇（TC），高密度脂蛋白（HDL），低密度脂蛋白含量（LDL），結(jié)果顯示，M5及T3高劑量組顯著降低血清TG、TC、LDL含量，顯著升高HDL含

4、量（P<0.05）。同時(shí)三株乳桿菌以相同劑量灌胃對(duì)照膳食組小鼠，并未對(duì)小鼠產(chǎn)生不良影響。綜上結(jié)果提示，M5及T3菌株能抑制高脂膳食引起的小鼠肥胖及血脂升高。
　　三株乳桿菌通過抑制肝臟脂質(zhì)累積及氧化應(yīng)激，從而抑制了非酒精性脂肪肝的發(fā)生：通過肝臟HE染色切片可見，乳桿菌灌胃高脂膳食小鼠后，T3及M5兩株菌明顯改善小鼠肝臟脂肪病變；通過對(duì)肝臟甘油三脂含量的測定可知，乳桿菌的灌胃降低了高脂膳食小鼠的肝臟TG含量，抑制了肝臟脂質(zhì)的累積，從

5、而抑制了脂肪肝的發(fā)生，其中T3及M5兩株菌效果顯著（P<0.05）；長期高脂膳食使小鼠肝臟受到氧化損傷，乳桿菌灌胃小鼠后，小鼠肝臟抗氧化酶SOD，GSH-Px，CAT水平顯著升高（P<0.05），且呈現(xiàn)出劑量依賴性；同時(shí)肝臟MDA水平下降，T-AOC水平升高，抗氧化能力增強(qiáng)，同樣是T3及M5兩株菌效果好于X12；并且小鼠體脂率與SOD、GSH-Px、CAT及T-AOC呈負(fù)相關(guān)，與MDA呈正相關(guān)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示乳桿菌T3及M5有效抑制了肝臟

6、的損傷，為預(yù)防肥胖引起的脂肪肝提供了新思路。
　　乳桿菌通過調(diào)節(jié)脂肪因子的表達(dá)來控制肥胖發(fā)生：采用ELISA法測定小鼠血清瘦素及脂聯(lián)素的含量，結(jié)果顯示M5及T3灌胃6周后，血清瘦素水平降低，及脂聯(lián)素水平顯著升高（P<0.05）；RT-PCR法檢測小鼠脂肪組織中相關(guān)脂肪因子的表達(dá)，結(jié)果顯示高脂膳食使PPAR-γ、TNF-α及FAS表達(dá)量顯著升高，經(jīng)M5及T3灌胃6周后顯著降低了其表達(dá)量；X12效果不顯著（P<0.05）。
　　

7、通過高通量測序方法對(duì)小鼠腸道菌群多樣性進(jìn)行分析。高脂膳食誘導(dǎo)的小鼠肥胖使小鼠腸道菌群發(fā)生變化，肥胖使厚壁桿菌與擬桿菌門的比值降低，乳桿菌M5、T3灌胃6周后，小鼠腸道菌群多樣性發(fā)生變化，通過PCoA分析可知，M5、T3干預(yù)使高脂膳食小鼠腸道菌群組成趨近于普通膳食小鼠。通過對(duì)結(jié)腸組織MDA和T-AOC含量的測定，結(jié)果顯示M5及T3顯著降低MDA，提高T-AOC含量（P<0.05）。結(jié)合高通量測序結(jié)果的比較分析可知，灌胃M5、T3后有效控制