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文檔簡介
1、子宮內(nèi)膜癌(Endometrial carcinoma,EC)是女性生殖道三大惡性腫瘤之一,約占女性癌癥總數(shù)的7%,占女性生殖道腫瘤的20%-30%。近年子宮內(nèi)膜癌發(fā)病率在世界范圍內(nèi)呈上升趨勢,且發(fā)生機(jī)制不清,尚未找到有效預(yù)防和治療子宮內(nèi)膜癌靶點(diǎn)。子宮內(nèi)膜癌分為兩型。Ⅰ型子宮內(nèi)膜癌占70%-80%,在長期雌激素刺激下發(fā)生,惡性程度低;肥胖、糖尿病、高血壓、胰島素抵抗、多囊卵巢綜合征等內(nèi)分泌紊亂和代謝失調(diào)是Ⅰ型子宮內(nèi)膜癌高危因素,又稱為雌
2、激素依賴性子宮內(nèi)膜癌。Ⅱ型子宮內(nèi)膜癌發(fā)病與雌激素過多、肥胖或糖尿病無關(guān),惡性程度高。
瞬時(shí)受體電位(transient receptor potential,TRP)通道是近年來發(fā)現(xiàn)的一大類存在于細(xì)胞膜或胞內(nèi)細(xì)胞器膜上的非選擇性陽離子通道蛋白。其家族中TRPV1在人體內(nèi)廣泛分布,因其可被辣椒素激活而被稱為辣椒素受體。辣椒素受體TRPV1在諸多生理功能中發(fā)揮重要作用,還與一些炎癥、腫瘤等病理變化相關(guān)。現(xiàn)有研究表明,TRPV1可改
3、善和防治包括上述雌激素依賴性子宮內(nèi)膜癌高危因素在內(nèi)的代謝異常,并與一些癌組織生長和進(jìn)展的調(diào)節(jié)相關(guān)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí),哺乳動(dòng)物子宮內(nèi)膜腺上皮表達(dá)TRPV1且呈雌激素依賴性上調(diào)。雖然目前研究顯示辣椒素受體TRPV1參與了多種腫瘤的生理和病理過程,但TRPV1在人子宮內(nèi)膜癌組織中的表達(dá)尚未見研究報(bào)道。
目的:
通過觀察子宮內(nèi)膜癌組織和細(xì)胞系TRPV1的表達(dá)情況,探討分析TRPV1在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)及其與子宮內(nèi)膜癌臨床病理特征
4、的關(guān)系,為子宮內(nèi)膜癌的臨床診斷及治療提供新思路、新靶點(diǎn)。
方法:
1.收集篩選河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院2009-11-2日至2015-8-31日間行手術(shù)治療的子宮內(nèi)膜癌石蠟標(biāo)本73例,其中Ⅰ型子宮內(nèi)膜癌34例(平均年齡為53.38±8.68),均為中高分化子宮內(nèi)膜樣腺癌,分期采用國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟(FIGO,2009)手術(shù)-病理分期標(biāo)準(zhǔn):Ⅰ期29例,Ⅲ期5例。Ⅱ型子宮內(nèi)膜癌39例(平均年齡58.41±8.76),包括透明細(xì)胞
5、癌24例、漿液性癌12例和低分化子宮內(nèi)膜樣腺癌3例。對(duì)照組選取因?qū)m頸鱗狀上皮高級(jí)別病變或鱗狀細(xì)胞癌行全子宮切除標(biāo)本的正常增殖期宮內(nèi)膜10例(平均年齡36.90±4.91);不伴細(xì)胞非典的子宮內(nèi)膜增生10例(平均年齡37.60±8.96),伴細(xì)胞非典的子宮內(nèi)膜增生10例(平均年齡40.8±8.39)。
2.免疫組織化學(xué)SP法測定TRPV1在不同類型子宮內(nèi)膜病變組織中的分布和表達(dá),分析其在子宮內(nèi)膜癌變過程中的作用及其與雌激素依賴性
6、子宮內(nèi)膜癌臨床病理特征的關(guān)系。陽性指免疫組織化學(xué)染色中細(xì)胞胞漿出現(xiàn)淺黃色至棕黃色顆粒。具體按以下標(biāo)準(zhǔn)判定:首先按照著色的程度計(jì)分:無著色者計(jì)作0分;淺黃色或略高于背景色者計(jì)作1分;棕黃色或明顯高于背景色者計(jì)作2分;強(qiáng)染或著棕褐色者計(jì)作3分。后按染色陽性細(xì)胞者所占百分率計(jì)分:<5%者計(jì)作0分;6%~25%計(jì)作1分;26%~50%計(jì)作2分;51%~75%者計(jì)作3分;>75%者計(jì)作4分。最后將兩項(xiàng)計(jì)分相加,按照總分?jǐn)?shù)分為4個(gè)等級(jí),即:0~1分
7、者評(píng)為陰性(-);>2分者均為陽性,其中2分者評(píng)為陽性(+);3~4分者評(píng)為中等陽性(++);而5分以上者評(píng)為強(qiáng)陽性(+++)。
3.培養(yǎng)人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系ISHIKAWA和HEC-1A(受贈(zèng)于北京大學(xué)人民醫(yī)院婦科實(shí)驗(yàn)室),前者為雌激素受體ER高表達(dá)癌細(xì)胞系,后者為雌激素受體ER低表達(dá)癌細(xì)胞系。對(duì)數(shù)生長期提取細(xì)胞蛋白,Western blot方法檢測TRPV1表達(dá)情況。
4.統(tǒng)計(jì)分析:數(shù)據(jù)采用SPSS19.0軟件進(jìn)行
8、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,計(jì)數(shù)資料以n%(N/N)表示,兩組之間的關(guān)系用卡方檢驗(yàn)分析,P<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)果:
1.一般資料
?、裥妥訉m內(nèi)膜癌患者中Ⅰ期子宮內(nèi)膜癌患者29例,包括Ⅰa期23例,Ⅰb期6例。Ⅲ期5例,包括Ⅲa期2例,Ⅲb期1例,Ⅲc期2例。不論分期,肌層浸潤程度小于1/2的患者25例,肌層浸潤深度大于等于1/2的9例。組織學(xué)分級(jí)Ⅰ級(jí)16例,Ⅱ級(jí)18例。Ⅱ型子宮內(nèi)膜癌患者
9、39例。
2.常規(guī)HE形態(tài)學(xué)觀察
34例Ⅰ型子宮內(nèi)膜癌組織均為中高分化子宮內(nèi)膜癌,表現(xiàn)為腺性或絨毛腺性結(jié)構(gòu),呈擁擠、復(fù)雜的分支結(jié)構(gòu)。部分病例伴有鱗狀分化和感染。核的非典型性不大。12例漿液性癌表現(xiàn)為復(fù)雜的乳頭和/或腺性結(jié)構(gòu),伴有顯著的核非典型性和多形性。24例透明細(xì)胞癌形態(tài)可見管囊狀、乳頭狀或?qū)嵭越Y(jié)構(gòu)。由多角形或鞋釘樣細(xì)胞構(gòu)成,可見灶性高級(jí)別核非典型性。3例低分化子宮內(nèi)膜樣腺癌組織核的非典型不大,但大部分癌組織失去腺
10、樣結(jié)構(gòu),呈實(shí)性片狀。
3.免疫組化結(jié)果
TRPV1陽性表達(dá)位于細(xì)胞胞漿和胞膜。在正常增殖期宮內(nèi)膜,TRPV1在腺上皮可見強(qiáng)表達(dá)。不伴細(xì)胞非典的子宮內(nèi)膜增生10例標(biāo)本和伴細(xì)胞非典的子宮內(nèi)膜增生10例標(biāo)本,其腺上皮TRPV1表達(dá)陽性率為100%。在73例子宮內(nèi)膜癌組織中,TRPV1總體表達(dá)陽性率為43.8%(32/73)。在Ⅰ型子宮內(nèi)膜癌的陽性表達(dá)率為73.5%(25/34),其中陰性表達(dá)9例,弱陽性表達(dá)12例,中陽性9
11、例,強(qiáng)陽性4例,進(jìn)一步分析表明其陽性表達(dá)和患者年齡、臨床-病理分期、組織學(xué)分級(jí)、肌層浸潤深度等臨床病理特征均無明顯關(guān)系。而在Ⅱ型子宮內(nèi)膜癌TRPV1的陽性表達(dá)率僅為15.4%(6/39),6例弱陽性表達(dá),余33例均為陰性表達(dá)。
4.Western blot結(jié)果顯示
ISHIKAWA癌細(xì)胞系表達(dá)TRPV1蛋白,而HEC-1A癌細(xì)胞系未檢測到TRPV1蛋白表達(dá)。
結(jié)論:
1.TRPV1在正常子宮內(nèi)膜和
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