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文檔簡介
1、目的:
本實驗通過研究不同力值正畸力作用下,牙周炎大鼠和正常大鼠正畸牙齒移動的距離和牙槽骨改建過程中BMP-2和RANKL表達(dá)和分布的變化。了解不同力值對于炎性牙周組織牙槽骨改建的影響,牙周炎大鼠牙槽骨改建與應(yīng)力的關(guān)系。探索牙周病正畸牙齒移動的適合力值及治療限度,為醫(yī)生臨床應(yīng)用提供理論和實驗依據(jù)。
材料與方法:
方法:選用7周齡的Wistar大鼠84只,隨機(jī)分成2組(n=42),A組(正常組)和B組(牙周炎
2、組),A組大鼠不作處理作,B組使用“牙頸部結(jié)扎絲結(jié)扎+高糖飲水”法4周,建立大鼠急性牙周炎模型,兩組大鼠均正常喂養(yǎng),高糖飲水,4周后兩組各隨機(jī)處死2只行病理組織切片進(jìn)行牙周炎的確認(rèn),建模成功后分別將A和B兩組再隨機(jī)分成4小組(n=10),于大鼠雙側(cè)上頜第一磨牙分別施加0g(A1,B1)、30g(A2,B2)、50g(A3,B3)、80g(A4,B4)力值,建立大鼠正畸牙齒移動模型(牙周炎大鼠在正畸加載前去除建模結(jié)扎絲),分別在加力后的1
3、d,3d,7d,14d,21d隨機(jī)處死大鼠,測量雙側(cè)上頜第一磨牙移動的距離,第一磨牙組織縱切片HE染色法觀察(牙周膜、牙槽骨、破骨細(xì)胞的變化),免疫組化法檢測大鼠牙周組織張力側(cè)BMP-2的表達(dá)及壓力側(cè)RANKL分布的變化。利用Biosens Digital Imaging Systen(上海山富科學(xué)儀器有限公司)高清晰度彩色病理圖文分析系統(tǒng)對獲取的圖片結(jié)果進(jìn)行積分光密度值測量,使用SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析,a=0.05。
4、> 結(jié)果:
1.B組大鼠肉眼觀:體型消瘦,牙齦組織呈暗紅色。牙周探診易出血,牙周有明顯的附著喪失,牙周袋明顯。組織學(xué)觀察:牙齦上皮釘突增生,炎細(xì)胞浸潤,牙槽嵴表面可見骨吸收陷窩和破骨細(xì)胞,說明成功建立了大鼠牙周炎動物模型。
2.各組大鼠加力1-7d時牙齒移動速度加快,7-14d牙齒移動減慢,14-21d時牙齒移動速度再次加快。A組大鼠牙齒移動距離組內(nèi)比較,A3組大鼠牙齒移動最快,與其他3組相比A4組大鼠牙齒移動較慢
5、,A、B組大鼠同力值t檢驗分析,B組大鼠牙齒移動的平均距離明顯大于 A組,且牙齒移動的速度明顯快于A組,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(p﹤0.05)。
3.HE染色顯示,A1組大鼠未加力狀態(tài)下各時間段相比牙周組織沒有明顯變化,A2組與A3組牙周組織改建活躍,在牙周組織張力側(cè)可見新生的成骨細(xì)胞,壓力側(cè)牙槽骨吸收陷窩和破骨細(xì)胞顯著,A4組可見牙周膜纖維排列紊亂、不規(guī)則,牙根局限性吸收。B1組可見到牙周附著喪失,牙周袋形成,牙周膜纖維排列紊亂
6、、不規(guī)則,有大量炎癥細(xì)胞侵潤,壓力側(cè)可見骨細(xì)胞吸收陷窩和破骨細(xì)胞。B2組和B3組牙周組織壓力側(cè)骨吸收陷窩較多,張力側(cè)牙周膜間隙增寬,可見新生的成骨細(xì)胞。B4組可見牙周膜纖維紊亂、斷裂,壓力側(cè)可見到牙骨質(zhì)吸收陷窩和破牙骨質(zhì)細(xì)胞,張力側(cè)成骨細(xì)胞少見。
4.A組大鼠組內(nèi)比較,各加力組與A1組相比BMP-2平均積分光密度值隨著力值的增大而增加,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(p﹤0.05),A3組與A4組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p>0.05)。B組
7、牙周組織張力側(cè)BMP-2表達(dá)趨勢與A組相似,但峰值出現(xiàn)時間存在差異,A組7d出現(xiàn)高峰,B組14d到達(dá)高峰,以后逐漸下降。A、B兩組相同力值下組間t檢驗分析,BMP-2的平均積分光密度值表達(dá)B組高于A組,但統(tǒng)計學(xué)分析顯示差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p>0.05)。
5.A組和B組隨著正畸力的增大,RANKL表達(dá)量也隨之增加,且均在第7d到達(dá)峰值,說明 RANKL的表達(dá)量與力值的增大呈正相關(guān)。但相同力值下組間比較RANKL的陽性表達(dá)B組高于
8、A組,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p>0.05)。
結(jié)論:
1.“牙頸部結(jié)扎絲結(jié)扎+高糖飲水”法可建成大鼠牙周組織的急性炎癥模型。
2.正畸過程中相同力值下牙周病組的牙齒移動距離大于正常組。
3.牙槽骨壓力側(cè)RANKL的表達(dá)和牙槽骨張力側(cè)BMP-2的表達(dá)均隨著力值的增大而增加,說明其表達(dá)量與正畸力值呈正相關(guān),均參與正畸牙周組織改建的過程。
4.牙槽骨張力側(cè)BMP-2的表達(dá)正常組的峰值在第7d,而
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