囊泡運(yùn)輸相關(guān)基因OsRab7在水稻抗鹽中的功能.pdf

1、鹽脅迫是抑制植物生長發(fā)育,減少農(nóng)作物產(chǎn)量的主要逆境脅迫之一。長期以來,如何提高植物的抗鹽能力,增加農(nóng)作物在高鹽脅迫下的產(chǎn)量一直是研究者關(guān)注的焦點(diǎn)。發(fā)掘植物中的抗鹽相關(guān)基因,從而探索植物對高鹽脅迫的耐受機(jī)制并提高農(nóng)作物對高鹽謝脅迫的抗性是當(dāng)前科學(xué)研究的重點(diǎn)問題。水稻是全世界重要的糧食作物之一,其產(chǎn)量受到了一些逆境脅迫(高鹽、高低溫)的嚴(yán)重影響。因此研究水稻的抗鹽,并進(jìn)一步提高水稻抗鹽能力具有重要意義。囊泡運(yùn)輸相關(guān)蛋白家族Rab家族在植物抗

2、鹽中起到某些關(guān)鍵作用,其中對Rab7的研究表明,AtRab7和NtRab7的過量表達(dá)分別提高了轉(zhuǎn)基因擬南芥及轉(zhuǎn)基因煙草對逆境脅迫(鹽脅迫,低溫)的耐受性。且有研究表明水稻的Rab7的表達(dá)也受到不同外界脅迫的調(diào)控,但在其在水稻應(yīng)答非生物脅迫(鹽脅迫,低溫)過程中的功能及其機(jī)理尚不清楚。
　　 本實(shí)驗(yàn)構(gòu)建了OsRab7的原核表達(dá)載體,研究了OsRab7蛋白的表達(dá)對大腸桿菌抗鹽,抗高、低溫的影響。并構(gòu)建了OsRab7的植物轉(zhuǎn)基因載體,

3、獲得陽性O(shè)sRab7轉(zhuǎn)基因水稻植株,研究轉(zhuǎn)基因植株苗期在高鹽條件下的生長發(fā)育表型(平均生長速率、根生長情況等),進(jìn)一步通過對轉(zhuǎn)基因植株幼苗在受到高鹽傷害后的恢復(fù)生長表型的觀測,基本明確OsRab7基因在水稻抗逆中的功能。其中對囊泡運(yùn)輸相關(guān)基因OsRab7在水稻中的抗鹽功能研究為水稻抗逆分子機(jī)制探索及水稻抗逆育種提供了理論與實(shí)踐基礎(chǔ)。
　　 主要結(jié)果如下:
　　 1.構(gòu)建了OsRab7的原核表達(dá)載體,并成功表達(dá)了OsRab

4、7蛋白。OsRab7陽性轉(zhuǎn)化子的抗鹽及抗高低溫研究證明,OsRab7的表達(dá)能夠提高大腸桿菌的抗逆(高鹽,高低溫)能力。
　　 2.成功構(gòu)建了OsRab7的轉(zhuǎn)基因載體(正義,反義,干擾,GFP),共獲得To代水稻植株222株,其中陽性植株196株,轉(zhuǎn)基因效率為88.2％。對T0代水稻植株進(jìn)行繁殖加代(各選20粒種子),共獲得T1代水稻陽性植株37株。對OsRab7的正義轉(zhuǎn)基因植株的抗鹽檢測表明,與野生型相比,正義轉(zhuǎn)基因的植株抗鹽能