組織蛋白酶D在膠質(zhì)瘤和膠質(zhì)細胞中的差異表達.pdf

1、背景和目的:膠質(zhì)瘤預后差的關(guān)鍵原因之一在于膠質(zhì)瘤的浸潤性生長。如何找到有效途徑阻斷膠質(zhì)瘤在顱內(nèi)的浸潤性生長具有重要意義。
　　目前較多觀點認為，膠質(zhì)瘤來源于膠質(zhì)細胞，且在顱內(nèi)膠質(zhì)瘤與膠質(zhì)細胞的相互作用較少報道。我們前期工作發(fā)現(xiàn)阻斷膠質(zhì)瘤細胞外釋放組織蛋白酶D（Cathepsin D，Cat D，CD），有可能阻斷膠質(zhì)瘤的浸潤。為進一步探討Cat D在膠質(zhì)瘤中的作用，我們比較了CatD在大鼠星形膠質(zhì)細胞、大鼠膠質(zhì)瘤細胞和人膠質(zhì)瘤細胞

2、系中的含量差別，觀察Cat D在三類細胞中的早期內(nèi)吞體、晚期內(nèi)吞體和溶酶體中的分布，并比較三種細胞分泌Cat D的含量差別，從而為進一步研究CatD在膠質(zhì)瘤進展及其治療中的作用建立基礎(chǔ)。
　　實驗方法:實驗研究對象為大鼠原代培養(yǎng)星形膠質(zhì)細胞、大鼠膠質(zhì)瘤細胞系和人膠質(zhì)瘤細胞系。Western檢測三種細胞中CatD的含量差別。細胞免疫組化觀察三種細胞中Cat D在早期內(nèi)吞體、晚期內(nèi)吞體和溶酶體中的分布。ELISA檢測三種細胞分泌Cat

3、D的含量差別。
　　實驗結(jié)果:
　　1、成熟的Cat D在星形膠質(zhì)細胞中的含量比在膠質(zhì)瘤細胞中增多。
　　2、成熟Cat D在星形膠質(zhì)細胞和膠質(zhì)瘤細胞中的溶酶體分布無顯著差異。
　　3、前體、中間體及成熟體Cat D在星形膠質(zhì)細胞和膠質(zhì)瘤細胞的早期內(nèi)吞體中未發(fā)現(xiàn)共定位。
　　4.相對于膠質(zhì)瘤細胞，星形膠質(zhì)細胞向外分泌更多CatD。
　　結(jié)論:不同類型Cat D在膠質(zhì)瘤細胞和星形膠質(zhì)細胞中的分布存在內(nèi)在