瘦素改善型2糖尿病ob-ob小鼠糖和脂質(zhì)代謝作用機制的探討.pdf

1、目的：研究瘦素對2型糖尿病小鼠體重、糖脂代謝及肝功能的改善作用，并從氧化應激、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激和胰島素抵抗等方面探討其可能機制。
　　方法：選用瘦素缺陷的ob/ob小鼠作為2型糖尿病動物模型，給或不給瘦素（1mg/kg/day，腹腔注射）處理，選用野生型C57BL/6J小鼠為正常對照組，記錄每天體重。羅氏血糖儀測定血糖；測定血清甘油三酯（TG）和膽固醇（TC）反映脂質(zhì)代謝狀況，血清谷丙轉氨酶（ALT）和谷草轉氨酶（AST）反映肝功能；

2、Elisa測定血清胰島素水平；western blot檢測氧化應激指標NOX4和抗氧化酶CAT、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激標志GRP78的蛋白水平，胰島素調(diào)控糖代謝經(jīng)典通路AKT-FoxO1的活化及糖異生關鍵酶Pepck的蛋白水平，胰島素調(diào)控脂質(zhì)代謝的關鍵分子mTOR的活化及脂質(zhì)合成相關酶Srebp1的蛋白水平。
　　結果：與野生型小鼠比較，ob/ob小鼠體重、血糖、血清TG和TC、血清ALT和AST活力以及血清胰島素水平皆明顯升高，這提示ob/

3、ob小鼠存在著糖、脂代謝異常和胰島素抵抗，并伴有肝臟的損傷；與ob/ob小鼠比較，瘦素處理的ob/ob小鼠的體重、血糖、血清TG和TC、血清ALT和AST活力以及血清胰島素水平皆明顯下降，這表明瘦素改善了ob/ob小鼠糖脂代謝異常和胰島素抵抗，同時減輕了肝臟的損傷。與野生型小鼠比較，ob/ob小鼠肝臟氧化應激指標NOX4和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激標志GRP78蛋白水平明顯增高，CAT明顯降低，這表明ob/ob小鼠肝臟存在著氧化應激和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激；與ob

4、/ob小鼠比較，瘦素處理的ob/ob小鼠肝臟中NOX4、GRP78明顯降低，CAT明顯升高，本結果提示瘦素可能通過下調(diào)NOX4蛋白表達減少ROS生成，提高CAT蛋白表達增強機體清除ROS能力，從而改變機體的氧化-還原能力對比，減輕氧化應激。
　　與野生型小鼠比較，ob/ob小鼠肝臟AKT308位點蘇氨酸和473位點絲氨酸磷酸化水平及FoxO124位點蘇氨酸磷酸化水平明顯降低，糖異生關鍵酶Pepck蛋白表達水平明顯增高，mTOR24

5、48位絲氨酸磷酸化水平和Srebp1蛋白水平明顯升高，這表明ob/ob小鼠AKT信號通路不能正常激活，從而引起糖代謝異常和胰島素抵抗，mTOR信號通路的持續(xù)激活進一步加劇了胰島素抵抗和脂代謝紊亂；與ob/ob小鼠比較，瘦素處理的ob/ob小鼠肝臟AKT磷酸化水平及FoxO1磷酸化水平明顯增高，Pepck蛋白表達水平明顯降低，mTOR磷酸化水平和 Srebp1蛋白表達水平明顯降低，這提示瘦素處理改善了胰島素信號通路傳導受阻的狀況，因此糖、