康心飲對(duì)缺血性心肌病大鼠心肌纖維化的影響.pdf

1、目的:
　　觀察康心飲(KXY)方藥對(duì)缺血性心肌病(ICM)大鼠心肌纖維化的影響，探討KXY對(duì)慢性心肌缺血的作用及可能機(jī)制，為康心飲的臨床實(shí)踐提供科學(xué)依據(jù)，同時(shí)為拓展溫陽化瘀行水藥的臨床應(yīng)用提供新思路。
　　方法:
　　48只雄性SD大鼠按照隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分8只為假手術(shù)組，余制備ICM大鼠模型，造模成功后隨機(jī)分為模型組、陽性對(duì)照組（卡托普利組）和康心飲組（KXY組），每組8只。假手術(shù)組開胸后冠狀動(dòng)脈左前降支只穿線不結(jié)

2、扎，其他3組大鼠進(jìn)行左冠狀動(dòng)脈前降支結(jié)扎，心電圖觀察Ⅱ?qū)?lián)ST段抬高和（或）T波高聳或者倒置改變，證明急性心肌梗死(AMI)造模成功。AMI后常規(guī)喂養(yǎng)4周，第5周開始，KXY組于8:00AM、4:30PM灌胃給藥治療，卡托普利組予卡托普利同一時(shí)間灌胃給藥。假手術(shù)組和模型組術(shù)后第5周開始按每天1ml/100g體重生理鹽水同一時(shí)間灌胃。治療2周后，取大鼠心臟，HE染色法、苦味酸天狼星紅染色后光鏡下觀察心肌形態(tài)的情況，Western Blot

3、檢測MMP-2、MMP-9和TIMP-2的蛋白含量，實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Real-time Quantitative polymerase chain reaction, qPCR)及免疫組化法檢測MMP-2、MMP-9和TIMP-2表達(dá)量。
　　結(jié)果:
　　(1)HE染色:與假手術(shù)組比，模型組心肌纖維數(shù)量減少，可見灶性心肌壞死，橫紋模糊、斷裂，肌纖維走向不規(guī)則，心肌細(xì)胞變性、水腫，并可見巨噬細(xì)胞等炎性細(xì)胞浸潤，細(xì)胞核濃縮;

4、與模型組相比，卡托普利組和康心飲組心肌纖維排列比較整齊，心肌細(xì)胞壞死明顯減少，可見少許心肌細(xì)胞變性水腫和炎性細(xì)胞浸潤。
　　(2)苦味酸天狼星紅染色:與假手術(shù)組比，模型組心肌間質(zhì)內(nèi)膠原纖維顯著增多;與模型組相比，卡托普利組和KXY組纖維化明顯減少。
　　(3)免疫組化檢測:與假手術(shù)組比，模型組MMP-2、MMP-9表達(dá)明顯增多（P＜0.01），TIMP-2表達(dá)減少（P＜0.05）;與模型組比，卡托普利組和KXY組MMP-2、

5、MMP-9表達(dá)明顯減少(P＜0.01），TIMP-2明顯增多（P＜0.05），兩治療組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。
　　(4)Quantitative Real-time PCR檢測:與假手術(shù)組比較，模型組MMP-2、MMP-9 mRNA表達(dá)增多(P＜0.01），TIMP-2 mRNA表達(dá)減少(P＜0.05);與模型組比較，卡托普利組和KXY組MMP-2、MMP-9 mRNA表達(dá)減少(P＜0.01），TIMP-2 mRNA表

6、達(dá)增加(P＜0.05)。
　　(5)Western Blot檢測:與假手術(shù)組比較，模型組MMP-2、MMP-9的蛋白表達(dá)量上升(P＜0.01），TIMP-2的蛋白表達(dá)量下降(P＜0.01）;與模型組比較，卡托普利組和KXY組的MMP-2、MMP-9的蛋白表達(dá)量下降(P＜0.01或P＜0.05)，TIMP-2的蛋白表達(dá)量上升(P＜0.05)。KXY對(duì)MMP-2、MMP-9、TIMP-2 mRNA的表達(dá)與其對(duì)蛋白表達(dá)的影響趨勢大致相同