富集未處理骨髓血的三維多孔徑聚已內(nèi)酯-羥基磷灰石(PCl-HA)組織工程支架成骨分化的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:探索富集未處理骨髓血(unprocessed bone marrow，UBM)的三維PCL-HA仿生復(fù)合支架的生物學(xué)性能及成骨分化潛能。
　　方法:利用FDM-3DP技術(shù)構(gòu)建具有多孔徑結(jié)構(gòu)的PCL-HA支架，分別接種BMSCs和軟骨細(xì)胞后行體外培養(yǎng)，并初步探究支架的生物學(xué)性能。實(shí)驗(yàn)分為兩組，即PCL-HA支架復(fù)合未處理骨髓血組（A組）和單純接種BMSCs至PCL-HA支架組（B組）。分別行體外成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)28d，觀察兩組支架

2、的細(xì)胞黏附增殖能力、微觀結(jié)構(gòu)及相關(guān)成骨分化性能。
　　結(jié)果:PCL-HA支架展現(xiàn)出良好的生物學(xué)性能，BMSCs和軟骨細(xì)胞接種72h后，三維多孔支架上BMSCs及軟骨細(xì)胞的相對(duì)密度顯著高于二維培養(yǎng)皿上的細(xì)胞密度。體外成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)，A組中BMSCs首先形成細(xì)胞集落，并A組活/死細(xì)胞比例培養(yǎng)早期有所下降，隨著培養(yǎng)的延續(xù)比例迅速回升，且比B組細(xì)胞增殖的速度更快（P＜0.05），A組的ALP表達(dá)水平和鈣含量均顯著高于B組(P＜0.05)。此

3、外，A組OPN、OCN基因表達(dá)水平顯著高于B組(P＜0.05)，而Cbfα1基因水平在培養(yǎng)早期兩組表達(dá)相當(dāng)，至成骨培養(yǎng)28d時(shí)，A組表達(dá)水平顯著低于B組(P＜0.05)。同時(shí)在成骨培養(yǎng)中通過掃描電鏡及茜素紅染色觀察，A組可見明顯鈣結(jié)節(jié)形成。
　　結(jié)論:三維多孔徑PCL-HA支架具有骨的擬態(tài)環(huán)境，與未處理骨髓血富集后能更好地促進(jìn)細(xì)胞粘附，并展現(xiàn)出更優(yōu)良的骨再生效果。本研究方案是一種高效、可靠、簡便的新方法，提高了PCL-HA支架的生