AG490通過調(diào)節(jié)Th17-Treg平衡緩解DSS誘導(dǎo)的幼鼠炎癥性腸病.pdf

1、目的：
　　探討JAK2抑制劑AG490對葡聚糖硫酸鈉誘導(dǎo)的炎癥性腸病模型幼鼠的影響及其可能機(jī)制。
　　方法：
　　將4周齡雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠40只隨機(jī)分為4組，正常組、模型組、DMSO干預(yù)組和AG490干預(yù)組。予模型組、DMSO干預(yù)組及AG490干預(yù)組幼鼠自由飲用3.5％葡聚糖硫酸鈉(dextran sulfate sodium，DSS)7天建立炎癥性腸病(inflammatory bowe

2、l disease，IBD)模型，每日觀察并記錄幼鼠體重、大便性狀、大便潛血/肉眼血便等一般狀況，進(jìn)行疾病活動(dòng)指數(shù)(disease activity index，DAI)評分，造模7天后處死，取自肛門至盲腸處腸段并測量全結(jié)腸長度，對近端結(jié)腸及遠(yuǎn)端結(jié)腸組織進(jìn)行蘇木素&伊紅(hematoxylin&eosin，H&E)染色觀察腸道炎癥改變并進(jìn)行結(jié)腸組織損傷評分，流式細(xì)胞技術(shù)檢測脾臟中調(diào)節(jié)性T(regulatory T，Treg)細(xì)胞和T輔助

3、細(xì)胞17(T helper17，Th17)比例變化，酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)檢測血清中白介素-10(interleukin-10，IL-10)、白介素-6(interleukin-6，IL-6)、白介素-17A(interleukin-17A，IL-17A)水平的變化。
　　結(jié)果：
　　經(jīng)過觀察比較幼鼠的一般情況發(fā)現(xiàn)模型組及DMSO干預(yù)組自造模第6天起出現(xiàn)體重增長緩慢，并伴有稀便、大便潛血/肉眼血便，最終導(dǎo)致DAI較正

4、常對照組急劇升高(p＜0.05)，AG490干預(yù)組的DAI較模型組及DMSO干預(yù)組明顯降低(p＜0.05)，炎癥性腸病幼鼠的一般情況明顯改善。測量全結(jié)腸長度結(jié)果顯示模型組及DMSO干預(yù)組全結(jié)腸長度明顯小于正常對照組，AG490干預(yù)組全結(jié)腸長度較模型組及DMSO干預(yù)組明顯增長(P＜0.05)。近端結(jié)腸組織切片H&E染色炎癥改變不顯著，各組間未見明顯差異。模型組及DMSO干預(yù)組遠(yuǎn)端結(jié)腸組織切片H&E染色可見出現(xiàn)明顯的隱窩及腸黏膜上皮損害、炎

5、癥細(xì)胞浸潤、腸壁顯著水腫，結(jié)腸組織損傷評分較正常對照組明顯升高(P＜0.05)，而AG490干預(yù)后腸黏膜損害較前兩組明顯減輕，并伴隨結(jié)腸組織損傷評分較模型組及DMSO干預(yù)組顯著下降（P＜0.05）。流式細(xì)胞技術(shù)結(jié)果顯示模型組及DMSO干預(yù)組幼鼠脾臟中CD25+Foxp3+ Treg細(xì)胞在CD4+T淋巴細(xì)胞中的比例明顯低于正常對照組(P＜0.05)，而Th17細(xì)胞在淋巴細(xì)胞中的比例顯著高于正常對照組(p＜0.05)，經(jīng)過AG490治療可使

6、Treg細(xì)胞比例較模型組及DMSO干預(yù)組顯著升高，Th17細(xì)胞比例較模型組及DMSO干預(yù)組降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05); ELISA檢測結(jié)果顯示模型組和DMSO干預(yù)組血清中IL-6及IL-17A水平較正常對照組明顯升高(p＜0.05)，而IL-10較正常對照組明顯降低(p＜0.05)，給予AG490干預(yù)后IL-6及IL-17A水平較模型組及DMSO干預(yù)組顯著降低(P＜0.05)，IL-10水平較模型組及DMSO干預(yù)組明顯升高