阿爾茨海默癥相關(guān)基因的克隆和細(xì)胞模型的建立.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、阿爾茨海默癥(Alzheimer's disease，AD)是患病率最高的老年性神經(jīng)系統(tǒng)疾病，臨床以記憶力、感覺能力、判斷力、思維能力、運(yùn)動(dòng)能力、情感反應(yīng)等降低為主。構(gòu)建阿爾茨海默癥的細(xì)胞模型對研究其病因、病理過程以及篩選防治阿爾茨海默病的新藥具有重要作用。本研究使用RT-PCR的方法從人神經(jīng)細(xì)胞中克隆了多個(gè)AD相關(guān)基因。在此基礎(chǔ)上用pcDNA3.1真核表達(dá)載體經(jīng)脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染U251細(xì)胞、G418篩選后獲得了APPsw(Lys595Asn

2、，Met596Leu)和野生型BACE1轉(zhuǎn)染的穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞株?；蚪MDNA PCR、RT-PCR和Western blot結(jié)果表明目的基因轉(zhuǎn)染成功并在mRNA和蛋白質(zhì)水平穩(wěn)定表達(dá)，APPsw蛋白和BACE1蛋白表達(dá)對U251細(xì)胞形態(tài)無明顯影響，APPsw(Lys595Asn,Met596Leu)轉(zhuǎn)染后APP蛋白和Abeta的表達(dá)量與對照組相比明顯增多，BACE1轉(zhuǎn)染組的Abeta產(chǎn)量明顯增多。本研究結(jié)果將為以后深入研究阿爾茨海默癥分子機(jī)

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