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1、目的:本實(shí)驗(yàn)旨在通過(guò)制造反復(fù)呼吸道感染肺脾氣虛型小鼠模型,給予灌喂健脾益氣,補(bǔ)肺固表之“加味玉屏風(fēng)散”,觀察小鼠血清中IgG、IgM含量的變化,評(píng)定小兒反復(fù)呼吸道感染與免疫功能的關(guān)系,研究反復(fù)呼吸道感染的發(fā)病因素與發(fā)病機(jī)制,且為加味玉屏風(fēng)散的臨床應(yīng)用提供理論依據(jù),以提高該病的防治水平。
方法:適應(yīng)性喂養(yǎng)5天,確認(rèn)健康后,取50只清潔級(jí)封閉群體重約18-22g,幼齡小鼠雌雄各半,按數(shù)字表法隨機(jī)分為5組,分別是空白組、肺脾氣虛模型
2、組、胸腺肽對(duì)照組、加味玉屏風(fēng)散高劑量組、加味玉屏風(fēng)散低劑量組5組,每組10只,造模期共60天。按文獻(xiàn)方法復(fù)制反復(fù)呼吸道感染肺脾氣虛模型,具體方法如下:將實(shí)驗(yàn)小鼠隨機(jī)分為空白組和造模組。(1)造模組小鼠每日上午置于0.5m3煙室中,用香煙煙熏,用2支,每支香煙約燃煙10分鐘,兩支香煙之間間隔5分鐘,每周連續(xù)6天。(2)在造模第20天開(kāi)始,配制出濃度為0.125g/ml的冰冷番瀉葉浸液,按1ml/100g體重的劑量給小鼠灌胃,每天1次,持續(xù)
3、30日。(3)木瓜蛋白酶霧化吸入在造模開(kāi)始后的第30、32、34、36天,具體操作方法如下:將一個(gè)大小約40cm3的透明霧化箱與超聲霧化器相連,每一次將5只造模小鼠放入透明霧化箱中。通過(guò)霧化管向箱中噴入0.3%的木瓜蛋白酶,每次霧化量2ml,共做4次。待造模小鼠普遍出現(xiàn)反應(yīng)遲鈍、少動(dòng)、精神萎靡、行動(dòng)遲緩、消瘦、皮膚彈性差、毛發(fā)零亂、脫落、缺少光澤,并出現(xiàn)咳嗽、氣短、氣急、乏力等肺氣虛癥狀以及納食減少、大便溏薄、困倦等脾氣虛的癥狀,說(shuō)明造
4、模成功。造模成功后,開(kāi)始治療,人鼠劑量換算按湯家銘主編的《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)》人和動(dòng)物的體表面積計(jì)算法計(jì)算??瞻捉M不喂藥,其余各組小鼠每日稱重后,按1ml/100g體重灌胃。模型組小鼠給予灌服生理鹽水,高、低劑量組分別灌服加味玉屏風(fēng)散煎劑分別含生藥12.5g/ml,3.15g/ml;胸腺肽組灌服胸腺肽稀釋液,濃度為0.411mg/ml,每日1次,共治療30天。每組分別于第91天采集樣本,用10%水合氯醛0.5ml/100g,腹腔注射進(jìn)行麻醉
5、。采用眼球摘除法取血,并離心取血清備用。觀察各組小鼠反復(fù)呼吸道感染癥狀好轉(zhuǎn)跡象及檢測(cè)血清中IgG,IgM含量的變化。
結(jié)果:中藥高劑量組與胸腺肽組相比均能明顯緩解模型小鼠的癥狀,并提高其血清中IgG,IgM含量,兩組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),說(shuō)明二者療效相當(dāng)。中藥高劑量與中藥低劑量相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05),兩組均有療效且存在量效關(guān)系。中藥低劑量組與胸腺肽組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05),胸腺肽組療效優(yōu)于中藥低
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