缺血缺氧致PVL新生大鼠Cx47表達及其對少突膠質細胞髓鞘化的影響.pdf

1、目的：
　　研究縫隙連接通道蛋白47(Connexin Cx47)在新生大鼠缺氧缺血性(HI)腦室周圍白質軟化(PVL)發(fā)生、發(fā)展中表達變化，并闡明Cx47對少突膠質細胞(Oligodendrocyte OL)髓鞘化的影響，試圖為HI性腦損傷的防治奠定實驗基礎。
　　方法：
　　將120只3日齡新生大鼠隨機分為實驗組60只和對照組60只。實驗組建立PVL動物模型，結扎3日齡新生大鼠右側頸總動脈后低氧2h（8％氧氣和92

2、％氮氣的混合氣體）;對照組不結扎僅分離右側頸總動脈，也不低氧。在手術后1、3、7、14天分別留取腦組織標本，采用HE染色、透射電鏡觀察腦組織形態(tài)學改變，免疫組織化學、Western blot和Real-Time PCR等分子生物學技術，檢測腦組織缺血缺氧后Cx47蛋白和基因表達的改變。
　　結果：
　　光鏡下可見對照組腦組織結構致密，神經膠質細胞形態(tài)完整，排列均勻，胞核大，染色清晰。HI組1d時腦白質區(qū)有明顯的細胞間隙增寬，

3、開始出現細胞腫脹、變形、細胞核固縮等;3d時即可見側腦室旁白質細胞大量的壞死，神經纖維走行紊亂，腦組織結構疏松模糊呈囊性及篩網狀壞死，7d腦室旁白質雖壞死區(qū)域更為廣泛，但其程度有所減輕呈簇狀及點狀壞死，水腫減輕出現不同程度膠質增生。14d腦白質胼胝體變薄，纖維走向紊亂，部分出現囊腔病變側腦室進行性擴大。透射電鏡下對照組呈現完整的細胞形態(tài)，且細胞間通過縫隙連接通道廣泛連接;而HI組可見溶解碎裂的少突膠質細胞間斷續(xù)的縫隙連接。免疫組化可見C

4、x47與MBP的表達，Cx47與MBP在蛋白和基因水平上均表現為隨著日齡的增加表達增加，與對照組比較，HI組各時間點Cx47的表達均相對降低，以3d、7d天最為明顯，且與MBP表達趨勢幾乎一致。
　　結論：
　　在HI致PVL中，Cx47的表達雖呈上升趨勢，但在3d和7d較對照組表達顯著降低，此階段為腦組織少突膠質細胞損傷及髓鞘化障礙發(fā)生關鍵時間，所以我們認為，在缺血缺氧后Cx47蛋白表達量的降低可能是影響少突膠質細胞損傷及