Apelin通過ERK通路拮抗谷氨酸誘導(dǎo)PC12細胞損傷.pdf

1、目的:
　　觀察 Apelin-13對谷氨酸誘導(dǎo)的PC12細胞損傷的影響，從ERK1/2信號通路的角度探討 Apelin-13對谷氨酸誘導(dǎo)神經(jīng)興奮性損傷的保護作用及其可能的機制。
　　方法:
　　建立谷氨酸損傷PC12細胞的模型，給予不同谷氨酸濃度（5、10、20mmol/L），找到最佳損傷濃度；給予不同 Apelin-13濃度(10、100nmol/l;1、10）μmol/L）找到最佳保護濃度；后加入U0126（ER

2、K1/2抑制劑）將實驗分成5組:Control、Glu、Glu+Apelin-13、Glu+Apelin-13+U0126、U0126，預(yù)先給予U0126培養(yǎng)30 min,后加入Apelin-13及 Glu共同培養(yǎng)。用 MTT比色法檢測細胞存活率；用Annexin V/PI流式細胞術(shù)檢測PC12細胞凋亡率；用Western Blot檢測細胞p-ERK1/2蛋白表達。
　　結(jié)果:
　　1、谷氨酸誘導(dǎo)PC12細胞損傷
　　

3、谷氨酸(5,10和20 mmol/L)處理24 h可濃度依賴性地降低PC12細胞的存活率，升高細胞的調(diào)亡率，下調(diào)p-ERK1/2蛋白的表達水平。
　　2、Apelin-13對谷氨酸誘導(dǎo)PC12細胞損傷的保護作用Apelin（1μmol/L）的與谷氨酸(10 mmol/L)共同處理 PC12細胞24 h后，細胞的存活率顯著提高，細胞凋亡率顯著降低。
　　3、ERK信號通路抑制劑U0126拮抗Apelin-13對谷氨酸誘導(dǎo)PC1