PAR4、類胰蛋白酶和nNOS在IBS-D患者直腸粘膜肥大細(xì)胞的表達(dá)及意義.pdf

1、目的:
　　研究蛋白酶激活受體4（PAR4）、類胰蛋白酶和神經(jīng)元型一氧化氮合酶（nNOS）在腹瀉型腸易激綜合征（IBS-D）患者直腸粘膜肥大細(xì)胞（MC）的表達(dá)和MC的變化，探討它們?cè)谀c易激綜合征（IBS）內(nèi)臟高敏感發(fā)病機(jī)制中的作用，從而加深對(duì)IBS-D的認(rèn)識(shí)，以期進(jìn)一步揭示IBS-D患者內(nèi)臟高敏感的發(fā)病機(jī)理。
　　方法:
　　選擇30位符合羅馬Ⅲ診斷標(biāo)準(zhǔn)的IBS-D病人作為實(shí)驗(yàn)組，選擇28位健康體檢者作為正常對(duì)照組。腸

2、鏡檢查時(shí)于距離肛門10-15厘米直腸處鉗取粘膜組織4塊，4％多聚甲醛固定，冰凍連續(xù)切片，依次進(jìn)行以下幾部分實(shí)驗(yàn)：（1）采用甲苯胺藍(lán)染色法分別計(jì)數(shù)兩組直腸粘膜MC數(shù)量；（2）采用免疫組化方法分別計(jì)數(shù)兩組直腸粘膜類胰蛋白酶表達(dá)陽(yáng)性的MC數(shù)量、脫顆粒數(shù)量；（3）采用免疫組化方法分別計(jì)數(shù)兩組直腸粘膜蛋白酶激活受體4（PAR-4）表達(dá)陽(yáng)性的MC的數(shù)量；（4）采用免疫組化方法分別計(jì)數(shù)兩組直腸粘膜表達(dá)神經(jīng)元型一氧化氮合酶（nNOS）的MC的數(shù)量。

3、r>　　結(jié)果:
　　1、甲苯胺藍(lán)染色技術(shù)發(fā)現(xiàn)：直腸粘膜的MC數(shù)量在IBS-D病人組為（12.80±1.35）個(gè)/高倍視野，健康對(duì)照組為（7.57±0.79）個(gè)/高倍視野，二者統(tǒng)計(jì)顯示（t=18.15， p=0.000<0.01），具有顯著性差異。
　　2、免疫組化技術(shù)發(fā)現(xiàn)：直腸粘膜類胰蛋白酶表達(dá)陽(yáng)性的MC數(shù)量在IBS-D病人組為（12.13±3.08）個(gè)/高倍視野，健康對(duì)照組為（7.43±0.57）個(gè)/高倍視野，二者統(tǒng)計(jì)顯示

4、（t=8.21，p=0.000<0.01），具有顯著性差異。IBS-D病人直腸粘膜的脫顆粒MC數(shù)量為（6.20±0.76）個(gè)/高倍視野，健康對(duì)照組為（1.82±0.77）個(gè)/高倍視野，二者統(tǒng)計(jì)顯示（t=21.74，p=0.000<0.01），具有顯著性差異。
　　3、免疫組化技術(shù)發(fā)現(xiàn)：直腸粘膜上PAR4表達(dá)陽(yáng)性的MC數(shù)量在IBS-D病人組為（7.20±2.07）個(gè)/高倍視野，健康對(duì)照組為（2.04±0.92）個(gè)/高倍視野，二者統(tǒng)計(jì)

5、顯示（t=12.39，p=0.000<0.01），具有顯著性差異。本實(shí)驗(yàn)環(huán)節(jié)證實(shí)在IBS-D患者的直腸粘膜上PAR4表達(dá)升高。
　　4、免疫組化技術(shù)發(fā)現(xiàn)：直腸粘膜上nNOS表達(dá)陽(yáng)性的MC數(shù)量在IBS-D病人組為（7.63±0.81）個(gè)/高倍視野，健康對(duì)照組為（2.14±0.76）個(gè)/高倍視野，二者統(tǒng)計(jì)顯示（t=26.66，p=0.000<0.01），具有顯著性差異。本實(shí)驗(yàn)環(huán)節(jié)證實(shí)在 IBS-D患者的直腸粘膜上nNOS表達(dá)升高。

6、r>　　結(jié)論:
　　1、IBS-D病人與健康對(duì)照組直腸粘膜的MC分布以粘膜固有層居多，IBS-D病人直腸粘膜的MC數(shù)量較健康對(duì)照組增多，IBS-D病人直腸粘膜類胰蛋白酶表達(dá)陽(yáng)性的MC較健康對(duì)照組增多，且脫顆粒增多，推測(cè)MC及類胰蛋白酶與IBS-D內(nèi)臟高敏感的發(fā)生密切相關(guān)。
　　2、PAR4在人體直腸粘膜的MC有表達(dá)，IBS-D病人直腸粘膜PAR4表達(dá)為陽(yáng)性的MC數(shù)量較健康對(duì)照組增多，提示IBS的發(fā)生可能與PAR4增多，而MC