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文檔簡介
1、用免疫組化、RT-PCR兩種方法,分別從蛋白、基因層面測定放射性肺損傷大鼠在不同時間點,四種因子的表達變化,研究益氣活血方對放射性肺損傷的防治作用,揭示其可能的作用機制。
健康雌性成年SD大鼠共108只,隨機分為模型組(model group)36只、空白對照組(control group)36只、照射加中藥組(Chineseherbology group)36只。模擬機下定位確定照射區(qū)域,照射野一般為3×3cm大小,5Gy/
2、次,共6次,每周2次。模型組、中藥組大鼠用6MV-X直線加速器照射其右肺,對照組只進行麻醉,不行照射。中藥組大鼠于受照射當天開始,用益氣活血方1ml灌胃,2次/日,模型組及對照組用蒸餾水1ml灌胃,2次/日,停止時間為照射結束后2周。三組大鼠分別于照射后第2,4,8,12,16,20周末隨機抽取6只,取其右肺組織保存。用RT-PCR方法檢測TGF-β1、TNF-a、NOS3、MTHFR mRNA在各時間點表達,用免疫組化法檢測TGF-β
3、1、TNF-a、NOS3、MTHFR在各時間點的蛋白表達,實驗數(shù)據(jù)用SPSS.19.0做統(tǒng)計分析。
中藥與模型組TGF-β1、TNF-a、NOS3、MTHFR mRNA及免疫組化表達積分光密度(IOD)值于照射后第2周至20周表現(xiàn)出先增高后下降的趨勢,第2周開始升高,第8周達高峰,12周開始下降,16周后逐漸降低,與對照組相比,變化具有統(tǒng)計學意義。中藥組與模型組相比TGF-β1、TNF-a表達降低,NOS3、MTHFR表達增高
4、,均具有統(tǒng)計學意義。
研究顯示TGF-β1、TNF-a、NOS3、MTHFR可能為放射性肺損傷發(fā)生的敏感因子。益氣活血方在放射性肺損傷各階段,從轉錄及翻譯層面對TGF-β1、TNF-a、NOS3、MTHFR的表達進行調控,使TGF-β1、TNF-a、NOS3、MTHFR表達趨于平衡,從而減輕放射性肺損傷,這可能是該藥防治放射性肺損傷的分子生物學機制。放射治療結束后各相關細胞因子仍持續(xù)高表達到16周,提示放射性肺損傷治療時間應延
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