金蓮花的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及UPLC指紋圖譜和模式識別研究.pdf

1、金蓮花為毛茛科植物金蓮花(Trollius chinensis Bunge)的干燥花，始載于《本草綱目拾遺》，具有抗菌、抗病毒、抗腫瘤和抗氧化活性，可用于呼吸道感染、咽炎、扁桃體炎和支氣管炎等癥的治療。我國境內(nèi)的金蓮花屬植物約16種，其中短瓣金蓮花(T.ledebouri Reichb.)、阿爾泰金蓮花(T.altaicusC.A.Mey)、長瓣金蓮花(T.macropetalus Fr.Schmidt)、川陜金蓮花(T.buddae)

2、、矮金蓮花(T.farreri)和毛茛狀金蓮花(T.ranunculoides)等在民間也常作藥用。歷版《中國藥典》均未收載金蓮花，地方標(biāo)準(zhǔn)中黑龍江省2001年版、上海市中藥標(biāo)準(zhǔn)1994年版、部頒標(biāo)準(zhǔn)蒙藥分冊收載有金蓮花，但其標(biāo)準(zhǔn)較為簡單，無TLC鑒別項(xiàng)及含量測定項(xiàng)，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)不能控制藥材質(zhì)量。因此，對金蓮花藥材以及相關(guān)中藥制劑的質(zhì)量控制研究至關(guān)重要。金蓮花的主要化學(xué)成分包括黃酮類、有機(jī)酸類和生物堿類。其中黃酮類成分最豐富，并且具有明顯的

3、生物活性，葒草苷和牡荊苷是其中含量最高兩種黃酮碳苷類化合物，它們及其衍生物所占金蓮花總黃酮的比例接近三分之二。葒草苷和牡荊苷被報(bào)道兩者均具有明顯的抗菌、抗病毒、抗癌、抗氧化、抗炎和鎮(zhèn)痛的藥理活性。因此，葒草苷和牡荊苷可以用于對金蓮花藥材質(zhì)量控制。本研究建立了中藥材金蓮花中葒草苷與牡荊苷的薄層鑒別方法和HPLC含量測定方法，為金蓮花藥材的質(zhì)量控制提供了科學(xué)依據(jù)。并采用超高效液相(ultra-performance liquid chrom

4、atography，UPLC)方法建立金蓮花的指紋圖譜，綜合反映了不同基源的金蓮花中主要成分的不同和含量差異，為金蓮花內(nèi)在質(zhì)量特征評價(jià)和分類提供了依據(jù)。
　　第一部分金蓮花質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究
　　目的:建立金蓮花藥材的質(zhì)量控制方法。
　　方法:薄層色譜法鑒別金蓮花中的葒草苷和牡荊苷;高效液相色譜法測定金蓮花中葒草苷和牡荊苷的含量，色譜柱為Shiseido Capcell pak C18MGⅡ(4.6×250mm;5μm)，

5、乙腈-0.1％磷酸溶液梯度洗脫，流速為1.0mL·min-1，檢測波長為340nm，溫度為40℃。
　　結(jié)果:薄層色譜鑒別，在與對照品相應(yīng)的位置上顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。葒草苷在7.59～379.62，μg/ml范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好，回歸方程為Y=25548.9728X+34229.8504，R2=0.9995，牡荊苷在2.31～115.50μg/ml范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好，回歸方程為Y=27760.6117X+10636.2063，

6、R2=0.9996，精密度、重復(fù)性、穩(wěn)定性良好，回收率在98～102％，RSD＜3％。
　　結(jié)論:本標(biāo)準(zhǔn)中建立的方法能較好地控制本品的質(zhì)量。
　　第二部分金蓮花UPLC指紋圖譜和模式識別研究
　　目的:建立金蓮花藥材的超高效液相色譜(UPLC)指紋圖譜的質(zhì)量評價(jià)方法。
　　方法:以3種不同基源的金蓮花藥材為研究對象，采用RP-UPLC法，色譜柱為ACQUITY UPLC BEH C18(100.0 mm×2.1

7、mm ID，1.7μm)，乙腈-0.1％磷酸溶液梯度洗脫，流速為0.3 mL·min-1，檢測波長為340nm，溫度為45℃。
　　結(jié)果:對38批樣品進(jìn)行測定，建立了金蓮花藥材的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜，采用對照品指認(rèn)了葒草素-2"-O-β-L-半乳糖苷、葒草苷及牡荊苷3個(gè)色譜峰，采用聚類分析和主成分分析法對指紋圖譜數(shù)據(jù)進(jìn)行了模式識別研究，可很好地區(qū)分金蓮花、短瓣金蓮花和阿爾泰金蓮花。
　　結(jié)論:所建立的金蓮花指紋圖譜專屬性強(qiáng)、方法快速