恭城月柿單寧提取純化工藝優(yōu)化及抗氧化活性初步研究.pdf

1、恭城月柿主要產(chǎn)于廣西恭城縣，因?yàn)槠涔忸伾髁痢⒖诟写嗄?、味道鮮甜，被譽(yù)為“中華名果”。每年恭城月柿在種植過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生15％～20％落果和疏果，這部分未成熟的月柿單寧含量豐富，含糖量少，可利用程度低。研究發(fā)現(xiàn)，單寧具有抗氧化、抗過(guò)敏、抑制腫瘤生長(zhǎng)、提高免疫力等效用。目前，單寧的研究依然存在純化困難，達(dá)不到食品、藥品安全質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)的問(wèn)題。改進(jìn)月柿單寧的提取、純化工藝，可以避免資源的浪費(fèi)。因此，本課題以澀柿（恭城月柿）為原料，對(duì)單寧的提取、

2、分離工藝進(jìn)行優(yōu)化，確定最佳的工藝條件。并且對(duì)恭城月柿的單寧的抗氧化活性進(jìn)行探究，為月柿單寧的產(chǎn)品的高值化開(kāi)發(fā)提供理論基礎(chǔ)。
　　本研究采用超聲波輔助提取的方法對(duì)月柿單寧的提取工藝進(jìn)行優(yōu)化。通過(guò)單因素和響應(yīng)面試驗(yàn)得到的最佳工藝條件為:乙醇濃度為40％、提取溫度為55℃、料液比為1∶15、超聲功率為300W、提取時(shí)間為1h。在此條件下，月柿水解單寧的提取量為23.64mg/g，縮合單寧的提取量為30.42mg/g。它們的提取率分別為8

3、0.61％和83.58％。
　　本研究通過(guò)大孔樹(shù)脂吸附法純化月柿的水解單寧。首先利用大孔樹(shù)脂XAD16對(duì)恭城月柿的水解單寧進(jìn)行初步的純化。通過(guò)樹(shù)脂的靜態(tài)吸附和解析試驗(yàn)，確定上樣液的濃度為0.5mg/mL，洗脫劑（乙醇）的濃度為75％。在靜態(tài)試驗(yàn)的研究基礎(chǔ)上進(jìn)行動(dòng)態(tài)試驗(yàn)，確定最合適的吸附條件為:流速1mL/min，徑高比為1∶15，樣液濃度為0.5mg/mL，上樣量為620mL。此時(shí)XAD16樹(shù)脂的吸附量為165mg。采用75％乙醇

4、洗脫，解析出來(lái)的水解單寧的含量為112mg，洗脫率為67.8％。
　　為了進(jìn)一步提高成品水解單寧的純度，利用大孔樹(shù)脂XAD1600對(duì)XAD16洗脫液進(jìn)行進(jìn)一步的純化。XAD1600樹(shù)脂的吸附的條件為:流速1mL/min，徑高比為1∶15，樣液濃度為0.5mg/mL，上樣量為550mL。此時(shí)XAD1600樹(shù)脂的吸附量為158mg。采用75％乙醇洗脫，解析出來(lái)的水解單寧的含量為127mg，洗脫率為80.3％。通過(guò)兩次的大孔樹(shù)脂的分離純

5、化得到的成品中水解單寧的純度為88.4％，相較于月柿的醇提物，水解單寧的純度提高了5.59倍。
　　用不同濃度的乙醇對(duì)月柿水解單寧進(jìn)行梯度洗脫，得到水解單寧含量較高的組分YD1、YD2、YD3、YD4，它們分別占洗脫出來(lái)的總水解單寧的16.14％、29.81％、17.39％、37.26％。純度分別為79.9％、85.4％、89.8％、87.1％。
　　本研究還對(duì)各組分恭城月柿水解單寧清除OH·、O2-·和DPPH·的效用進(jìn)行

6、了探究。研究發(fā)現(xiàn)，在設(shè)定的濃度范圍內(nèi)，各組分中的水解單寧對(duì)于OH·清除率呈現(xiàn)劑量關(guān)系。在0.6～1.0mg/mL范圍內(nèi)，YD3清除OH·的效果高于沒(méi)食子酸。在1.0mg/mL時(shí)的清除率為32.82％。在0.05～0.20mg/mL的范圍內(nèi)，YD3清除O2-·的效果高于YD1，YD2，YD4，略低于沒(méi)食子酸。在濃度為0.20mg/mL時(shí)，YD3能夠清除44.12％的O2-·，只比沒(méi)食子酸低了2.66％。在清除DPPH·的試驗(yàn)中，YD3對(duì)于