長角血蜱卵巢發(fā)育中交配效應(yīng)的研究.pdf

1、蜱類屬于節(jié)肢動(dòng)物,是一種專性吸血的外寄生動(dòng)物。它作為一種重要的媒介動(dòng)物,其分布范圍廣泛,宿主種類也較多。它具有很強(qiáng)的繁殖能力,可以傳播多種疾病,對(duì)人類健康和畜牧業(yè)生產(chǎn)造成極大的危害,這已經(jīng)引起了許多科學(xué)家的密切關(guān)注。蜱類生殖生理學(xué)一直是本領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。吸血和交配是蜱類生殖過程中的兩種重要生理習(xí)性。雌雄個(gè)體發(fā)生交配后,導(dǎo)致雌性在生理和行為方面發(fā)生一系列相關(guān)的變化,即發(fā)生了交配效應(yīng)。長角血蜱Haemaphysalis longicorni

2、s是廣泛分布于河北省的優(yōu)勢(shì)蜱種之一,本課題以長角血蜱作為研究對(duì)象,對(duì)雌蜱卵巢發(fā)育過程中的交配效應(yīng)進(jìn)行相關(guān)研究。
　　本實(shí)驗(yàn)通過對(duì)交配后(飽血當(dāng)天)雌蜱的生理指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定,發(fā)現(xiàn)其體重約是未交配(吸血時(shí)間和飽血時(shí)間相同)時(shí)期的10倍,卵巢重量及其卵巢蛋白含量均為未交配雌蜱的3倍。利用透射電鏡觀察卵巢的超微結(jié)構(gòu),發(fā)現(xiàn)交配后雌蜱的卵巢與未交配時(shí)期相比有明顯差異。其卵母細(xì)胞中粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、線粒體、脂滴和糖原顆粒數(shù)量比未交配時(shí)期顯著增加。運(yùn)用分

3、子生物學(xué)的方法成功構(gòu)建了卵巢抑制消減cDNA文庫,通過對(duì)文庫中部分的克隆進(jìn)行測(cè)序和比對(duì)分析,得到了33個(gè)EST(Expressed Sequence Tag)。BlastX分析顯示,所得cDNA編碼的功能性蛋白主要包括酶類、糖類代謝、能量代謝、轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)及蜱體內(nèi)信號(hào)傳遞等相關(guān)蛋白,這些蛋白大多與蜱類的生殖發(fā)育關(guān)系密切。此外用SDS—PAGE方法分析交配后的卵巢全蛋白,檢測(cè)到了三條差異性蛋白條帶,并采用高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(LC-MS