膽汁淤積性肝病患兒腸道微生態(tài)學(xué)變化.pdf

1、目的：近年來嬰兒膽汁淤積性肝病的發(fā)病率呈逐年上升趨勢，已成為中國兒童肝病住院的首位原因，嚴(yán)重威脅嬰兒健康。多種因素影響該病的發(fā)生、發(fā)展，除感染、膽道發(fā)育異常等因素外，腸道微生物群可通過腸-肝軸和腸肝循環(huán)影響肝臟功能，促進疾病的發(fā)生進展。本研究采用實時熒光定量PCR（FQ-PCR）技術(shù)定量檢測膽汁淤積性肝病患兒糞便標(biāo)本中雙歧桿菌、乳酸桿菌、大腸桿菌、腸球菌DNA濃度，并與患兒相關(guān)肝功能指標(biāo)的變化進行相關(guān)性分析，闡明相互間關(guān)系，從微生態(tài)學(xué)角

2、度說明膽汁淤積性病的發(fā)病機制，闡釋腸道微生態(tài)學(xué)變化在疾病發(fā)生發(fā)展中的作用地位，為今后通過調(diào)整腸道菌群構(gòu)成防治嬰兒膽汁淤積性肝病提供理論依據(jù)。
　　方法：選擇2014年11月-2015年12月在河北醫(yī)科大學(xué)第三醫(yī)院兒科和河北省省兒童醫(yī)院消化科的符合嬰兒膽汁淤積性肝病診斷標(biāo)準(zhǔn)的住院患兒30例（病例組）；選取同期在河北醫(yī)科大學(xué)第三醫(yī)院健康查體嬰兒，并符合對照組入選標(biāo)準(zhǔn)嬰兒30例（對照組）。入選嬰兒均為石家莊市或其周邊縣市居民，其生活方式

3、、飲食環(huán)境、居住環(huán)境、氣候環(huán)境等相當(dāng)。所入選嬰兒在研究前均征得患兒家長的知情同意，簽署知情同意書，并獲得河北醫(yī)科大學(xué)第三醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會通過。本研究分兩部分，即腸道菌群定量分析和實驗室肝功能指標(biāo)檢測。嚴(yán)格按要求收集兩組嬰兒糞便標(biāo)本，采用熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Flurogenic Quantitative Polym-erase Chain Reaction,FQ-PCR)技術(shù)，測定糞便中雙歧桿菌(Bifido bacteria)、乳

4、酸桿菌（Lactobacillus）、大腸桿菌（Escherichia coli）、腸球菌（Enterococcus）含量；兩組嬰兒采其空腹靜脈血，應(yīng)用生化檢驗比色法和生化檢驗速率法分別檢測血清肝功能指標(biāo)(總膽紅素(TBIL)、直接膽紅素(DBIL)、總膽汁酸(TBA)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(γ-GT))。對膽汁淤積性肝病患兒腸道菌群變化和相關(guān)肝功能指標(biāo)進行相關(guān)性分析。統(tǒng)計分析采用 SPSS13.0軟件，計量資料

5、均進行正態(tài)性檢驗及方差齊性檢驗,以α=0.05作為檢驗水準(zhǔn)。
　　結(jié)果：
　　1.腸道菌群定量分析
　　與對照組比較，病例組患兒糞便中雙歧桿菌、乳酸桿菌數(shù)量降低，以雙歧桿菌下降為著；大腸桿菌、腸球菌數(shù)量升高，以大腸桿菌增高為著；B/E值降低，出現(xiàn)腸道菌群失衡。
　　2.肝功能指標(biāo)檢測
　　與對照組比較，病例組患兒外周血中TBIL、DBIL、TBA、ALT、γ-GT均明顯升高。
　　3.患兒糞便中雙歧桿

6、菌、乳酸桿菌、大腸桿菌、腸球菌數(shù)量及B/E值與肝功能相應(yīng)指標(biāo)進行相關(guān)性分析
　?、偌S便中雙歧桿菌與DBIL、TBA、γ-GT、呈負相關(guān)，r=-0.483，P=0.012＜0.05；r=-0.455，P=0.019＜0.05；r=-0.597，P=0.001＜0.05。
　　②乳酸桿菌與肝功能相關(guān)指標(biāo)無相關(guān)性（P＞0.05）。
　　③大腸桿菌與TBIL、TBA呈正相關(guān)，r=0.509，P=0.008＜0.05，r=0.3

7、90，P=0.049＜0.05；
　?、苣c球菌與TBIL呈正相關(guān)，r=0.389，P=0.049＜0.05。
　?、軧/E值與ALT呈負相關(guān)，r=-0.403，P=0.041＜0.05。
　　結(jié)論：
　　1.本研究結(jié)果顯示:膽汁淤積性肝病患兒腸道中雙歧桿菌、乳酸桿菌數(shù)量降低，以雙歧桿菌降低為著，大腸桿菌、腸球菌數(shù)量增加，以大腸桿菌增加為著,B/E值降低，存在腸道菌群失調(diào)。
　　2.研究進一步顯示:膽汁淤積性

8、肝病患兒腸道厭氧菌中的雙歧桿菌數(shù)量與外周血結(jié)合膽紅素（DBIL）、總膽汁酸(TBA)、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(γ-GT)指標(biāo)呈負相關(guān)；而乳酸桿菌數(shù)量與上述肝功能指標(biāo)無相關(guān)性。需氧菌中大腸桿菌和腸球菌數(shù)量與總膽紅素及膽汁酸指標(biāo)存在正相關(guān)，表明腸道菌群中某些細菌參與機體膽汁代謝，并存在菌種特異性。
　　3.本研究結(jié)論從微生態(tài)學(xué)角度揭示了膽汁淤積性肝病的發(fā)病機制，為今后采用微生態(tài)制劑防病治病提供理論依據(jù)，同時也證實了微生態(tài)制劑應(yīng)用根據(jù)其目的不