益氣活血方治療大鼠脊髓型頸椎病的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:采用急性毒性試驗(yàn)評(píng)價(jià)臨床經(jīng)驗(yàn)方“益氣活血方”的安全性，采用耳廓腫試驗(yàn)、醋酸扭體法研究該方的抗炎鎮(zhèn)痛作用，采用大鼠脊髓型頸椎病模型研究該方對(duì)大鼠受損脊髓神經(jīng)功能恢復(fù)的影響，闡明其促進(jìn)脊髓功能恢復(fù)的相關(guān)作用機(jī)制，為中藥“益氣活血方”的臨床應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)及指導(dǎo)。
　　方法:1、20只ICR小鼠隨機(jī)選取5只為對(duì)照組，余15只為實(shí)驗(yàn)組，采用最大給藥量的方法研究益氣活血方的急性毒性反應(yīng);2、以二甲苯致小鼠耳腫脹法以及醋酸扭體法等作為基

2、礎(chǔ)研究方法，以高、中、低濃度益氣活血方灌胃小鼠5天，研究該方的抗炎鎮(zhèn)痛效果;3、60只SD大鼠，隨機(jī)選取10只作為假手術(shù)組:僅暴露椎板，未造成脊髓壓迫，以生理鹽水(Normal Saline，NS)進(jìn)行灌胃;其余的SD大鼠采用“自體第七頸椎棘突椎間移植法”制造大鼠脊髓型頸椎病模型，術(shù)后第1天根據(jù)脊髓功能的評(píng)分將其分為:A組:造模后，以高、中、低濃度益氣活血方進(jìn)行灌胃;B組:造模后，以頸復(fù)康進(jìn)行灌胃;C組:造模后，以NS進(jìn)行灌胃。造模后對(duì)

3、大鼠進(jìn)行為期4周的連續(xù)灌胃，每周均采用改進(jìn)Rivaling的斜板試驗(yàn)、改良Tarlov評(píng)分、BBB評(píng)分等方法評(píng)估大鼠運(yùn)動(dòng)功能的恢復(fù)程度。灌胃結(jié)束后，采用HE染色法觀察受損脊髓組織的形態(tài)學(xué)改變和ELISA方法測(cè)定大鼠受損節(jié)段中SOD、MDA、PGE2、PLA2的含量。
　　結(jié)果:1、小鼠的日最大給藥量是臨床成人日用量的315倍，相當(dāng)于生藥的892.5g·kg-1，在該劑量下未見明顯毒性反應(yīng)，7天內(nèi)未出現(xiàn)動(dòng)物死亡現(xiàn)象;2、發(fā)現(xiàn)高、中、

4、低濃度的益氣活血方均能顯著抑制二甲苯致小鼠耳腫脹的作用，能減輕冰醋酸致小鼠扭體反應(yīng)次數(shù)。3、行為學(xué)觀察:高、中、低濃度益氣活血方及頸復(fù)康均能顯著增加Rivaling的斜板試驗(yàn)的平均度數(shù)、Tarlov評(píng)分、BBB評(píng)分，與NS組相比效果顯著(P＜0.05)。4、HE染色:受損脊髓組織形態(tài)學(xué)的觀察結(jié)果顯示，中藥高、中、低濃度組以及頸復(fù)康組的受損脊髓組織內(nèi)均可見膠質(zhì)瘢痕和空洞形成，且空洞總面積均明顯小于NS組。5、ELISA方法:通過(guò)檢測(cè)大鼠受

5、損脊髓組織中的炎癥因子發(fā)現(xiàn)，高、中濃度益氣活血方及頸復(fù)康均能顯著降低受損脊髓組織內(nèi)PGE2的含量(P＜0.05);高、中、低濃度益氣活血方及頸復(fù)康均能顯著減低受損脊髓組織內(nèi)PLA2的含量(P＜0.05);高、中、低濃度益氣活血方及頸復(fù)康顆粒均能顯著增加大鼠受損脊髓組織內(nèi)SOD的含量(P＜0.05);高、中濃度的益氣活血方以及頸復(fù)康顆粒均能顯著降低脊髓組織內(nèi)的MDA含量(P＜0.05);低濃度益氣活血方亦可降低其組織內(nèi)PGE2、MDA含量