艱難梭菌感染的臨床特征、分子流行病學(xué)及腸道菌群研究.pdf

1、目的：本課題旨在分析老年住院患者艱難梭菌感染（Clostridium difficile infection，CDI）的臨床特征并評(píng)估其相關(guān)的危險(xiǎn)因素，尋找臨床與社區(qū)分離的艱難梭菌在毒素型、基因分型和耐藥性上的差異，以及探究艱難梭菌感染患者和無癥狀艱難梭菌定植者腸道菌群的改變，為艱難梭菌相關(guān)性疾病的預(yù)防、治療和監(jiān)控提供參考和依據(jù)。
　　方法：第一部分，對(duì)2010年12月至2013年5月間上海某三甲醫(yī)院大于60歲的202名老年住院患

2、者的病史資料進(jìn)行回顧性分析，其中包含52名CDI患者（病例組）和隨機(jī)選取的150名非CDI患者（對(duì)照組）。采用適當(dāng)?shù)慕y(tǒng)計(jì)學(xué)方法比較病例組和對(duì)照組之間臨床表現(xiàn)、實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)和治療用藥等方面的差異，并用logistic回歸分析評(píng)估一系列與老年住院患者艱難梭菌感染相關(guān)的危險(xiǎn)因素。第二部分，對(duì)來源于臨床CDI患者的45株艱難梭菌和來源于社區(qū)無癥狀艱難梭菌定植者的12株艱難梭菌（共計(jì)57株）進(jìn)行毒素基因檢測(cè)，并通過多位點(diǎn)序列分型技術(shù)實(shí)現(xiàn)菌株的基因分

3、型，同時(shí)采用瓊脂稀釋法分析菌株對(duì)8種抗菌藥物（包括：克林霉素、四環(huán)素、頭孢西丁、頭孢噻肟、莫西沙星、亞胺培南、甲硝唑和萬古霉素）的敏感性。第三部分，我們收集8名CDI患者、8名無癥狀艱難梭菌定植者和9名健康受試者的新鮮糞便樣本，采用16S rRNA基因高通量焦磷酸測(cè)序法對(duì)三組樣本進(jìn)行腸道菌群分析，并借助生物信息學(xué)技術(shù)，從細(xì)菌“門”和“屬”水平比較CDI患者、無癥狀艱難梭菌定植者和健康受試者間腸道菌群組成的差異。
　　結(jié)果：在老年住

4、院患者中，CDI患者相比非CDI患者表現(xiàn)出白細(xì)胞計(jì)數(shù)升高、血清白蛋白含量降低、住院時(shí)間延長(zhǎng)、死亡率上升等特征。多變量分析表明，老年住院患者艱難梭菌感染與血清肌酐水平（OR1.004;95％CI1.001-1.008）、共病數(shù)量（OR2.573;95%CI1.353-4.892）、外科手術(shù)史（OR6.132;95%CI2.594-14.493）、胃腸道疾病（OR4.670;95%CI2.002-10.895）和抗生素使用（OR6.718;

5、95%CI2.846-15.859）密切相關(guān)。臨床分離的艱難梭菌菌株均產(chǎn)毒素，毒素型以A+B+型為主，ST-37型為流行克隆，占33.3%；而社區(qū)分離菌株中含無毒株，且存在某些與臨床分離菌株相同的ST型。此外，臨床分離菌株的多重耐藥率高于社區(qū)分離菌株，尤其對(duì)氟喹諾酮類藥物的耐藥率明顯上升。CDI患者和無癥狀艱難梭菌定植者存在不同程度的腸道菌群失調(diào)，與健康人相比，他們的腸道微生物豐度和多樣性均明顯降低，腸道菌群組成中擬桿菌門和厚壁菌門的比

6、例下降、變形菌門的比例升高，且缺失某些產(chǎn)丁酸鹽的腸道正常共生菌。主坐標(biāo)分析顯示，CDI患者與無癥狀艱難梭菌定植者之間的腸道菌群結(jié)構(gòu)也存在明顯差異。
　　結(jié)論：血清肌酐水平升高、共病數(shù)量增加、外科手術(shù)史、胃腸道疾病和抗生素使用是老年住院患者艱難梭菌感染的危險(xiǎn)因素。多重耐藥性可能是導(dǎo)致CDI流行傳播的重要原因之一，而社區(qū)無癥狀艱難梭菌定植者很可能成為臨床艱難梭菌感染的潛在來源。腸道菌群的改變不僅影響CDI的發(fā)生，還對(duì)艱難梭菌相關(guān)性疾病