基于多層次相互作用網(wǎng)絡(luò)的夏枯草抗腫瘤有效成分篩選及處方設(shè)計(jì).pdf

1、夏枯草（Prunella vulgaris L.）為唇形科植物，具有多種藥理作用，研究發(fā)現(xiàn)其具有較好的抗腫瘤作用，其水提物已應(yīng)用于臨床，但夏枯草抗腫瘤藥效物質(zhì)基礎(chǔ)和分子作用機(jī)制尚不清楚。目前夏枯草的制劑大多為湯劑或提取物的簡(jiǎn)單制劑，由于其成分復(fù)雜，無(wú)法有效地進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)和控制。本研究采用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法篩選得到夏枯草中具有廣泛協(xié)同抗腫瘤作用的三個(gè)代表性化合物，并利用固體分散技術(shù)制備多組分緩釋制劑，建立了該制劑的體內(nèi)外檢測(cè)和評(píng)價(jià)體系。全文圍

2、繞夏枯草協(xié)同抗腫瘤作用活性成分篩選及難溶性多組分制劑的體內(nèi)外評(píng)價(jià)開展研究，主要分為以下四個(gè)部分：
　　1.綜述
　　本章主要針對(duì)抗腫瘤藥物研究現(xiàn)狀、中藥網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究、中藥難溶性多組分制劑的研究現(xiàn)狀以及夏枯草抗腫瘤作用進(jìn)行回顧總結(jié)。首先分析了FDA批準(zhǔn)上市的抗腫瘤藥物的發(fā)展?fàn)顩r，發(fā)現(xiàn)多靶點(diǎn)抗腫瘤藥物已成為當(dāng)前研究的熱點(diǎn)，并且中藥因其多靶點(diǎn)協(xié)同作用的特點(diǎn)日漸引起研究者的關(guān)注；其次本章總結(jié)了網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)在中藥研究中的進(jìn)展，為本研究

3、提供方法學(xué)支撐；另外本章整理了模型藥物夏枯草的抗腫瘤研究進(jìn)展，為本研究提供了數(shù)據(jù)基礎(chǔ)；最后整理綜述了固體分散技術(shù)及中藥制劑的研究進(jìn)展，為本研究的難溶性多組分制劑提供理論支撐。本部分內(nèi)容是與本研究相關(guān)的思路和方法學(xué)總結(jié)，為研究的開展提供重要的參考。
　　2.基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的夏枯草抗腫瘤活性成分篩選
　　本章根據(jù)與夏枯草和腫瘤疾病相關(guān)的化學(xué)成分、生物分子（或靶點(diǎn)）等信息構(gòu)建了夏枯草化學(xué)成分—生物分子（或靶點(diǎn)）—腫瘤疾病的多層次相

4、互作用網(wǎng)絡(luò)，并通過(guò)連接度分析和網(wǎng)絡(luò)模塊挖掘解析得到夏枯草中抗腫瘤作用藥效成分群。隨后利用篩選得到的化學(xué)成分的抗腫瘤作用相關(guān)通路信息進(jìn)一步對(duì)其協(xié)同作用進(jìn)行考察，篩選得到具有廣泛協(xié)同抗腫瘤作用的夏枯草代表性化學(xué)成分組合，通過(guò)MTT細(xì)胞實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證該組合的協(xié)同作用并確定最佳協(xié)同比例。結(jié)果表明，夏枯草中蘆丁、槲皮素和熊果酸的組合能夠調(diào)控多條抗腫瘤通路，且當(dāng)其加藥量均為4μg時(shí)就能獲得96％的腫瘤細(xì)胞抑制效果，可很好地反映夏枯草的抗腫瘤作用。

5、　　3.難溶性多組分制劑的處方設(shè)計(jì)
　　本章以體外釋放度為指標(biāo)，對(duì)網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)篩選得到的夏枯草代表性抗腫瘤成分進(jìn)行處方設(shè)計(jì)。由于蘆丁、槲皮素、熊果酸均為難溶性物質(zhì)，本研究采用先對(duì)各成分進(jìn)行速釋處方設(shè)計(jì)，增加其體外釋放度，隨后選擇適合的緩釋載體，調(diào)控其釋藥過(guò)程的策略以達(dá)到各組分平緩釋放。本研究考察了兩種處方設(shè)計(jì)思路，第一種是將三種成分分別先增溶后制成緩釋固體分散體，然后混合；第二種是將三種成分作為一個(gè)整體，共同增溶后制備成緩釋固體分散

6、體。通過(guò)比較以上兩種設(shè)計(jì)思路的固體分散體的體外釋藥情況，以提高各組分的釋藥率和保證其在體外維持較長(zhǎng)時(shí)間平緩釋放為依據(jù)最終確定最佳處方為：利用乙醇將三種成分混合溶解，選擇PVPK30和EC作為載體，控制藥載比是1:6:3，藥物與載體的作用時(shí)間為30min。三種成分的8h體外釋藥曲線之間的相似因子均大于50，由此可知，該處方制劑中三個(gè)成分能夠在體外8h內(nèi)維持平穩(wěn)釋放。通過(guò)DSC和紅外波譜證實(shí)得到的制劑為固體分散體制劑。
　　4.難溶性

7、多組分制劑的大鼠體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)研究
　　本章以 SD大鼠為模型動(dòng)物，建立了制劑中三種成分的體內(nèi)檢測(cè)分析方法，考察了該難溶性多組分緩釋制劑在大鼠體內(nèi)的釋藥情況。結(jié)果表明，以三種成分的物理混合制劑作為參比制劑，緩釋制劑中蘆丁、槲皮素、熊果酸的最大血藥濃度分別為：2.920±0.987μg/mL、2.486±0.768μg/mL、1.941±0.852μg/mL均高于原料藥（0.933±0.135μg/mL、0.883±0.1002μg/m

8、L、0.919±0.221μg/mL）；其半衰期分別為9.219h、11.887h、17.086h較原料藥分別延長(zhǎng)5.278h、7.426h、11.155h；且制劑后相對(duì)生物利用度分別為574.92%、357.77%、306.03%。因此本研究的難溶性多組分緩釋制劑具有較好的緩釋效果且提高了各成分的生物利用度。為進(jìn)一步考察三種成分的體內(nèi)協(xié)同抗腫瘤作用提供了可行性。
　　綜上所述，通過(guò)網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)篩選得到中藥藥效物質(zhì)并對(duì)多組分藥效物質(zhì)