應用循環(huán)腫瘤細胞解析胰腺癌上皮-間質(zhì)轉化全程及其臨床意義探究.pdf

1、胰腺癌早期即具有極強的侵襲轉移能力，導致臨床上確診胰腺癌的患者手術可切除率低，臨床預后極差。上皮-間質(zhì)轉化(Epithelial-Mesenchymal Transition，EMT)被認為是腫瘤的侵襲轉移的關鍵機制之一，但通常只能對原位腫瘤及轉移灶進行研究，無法對腫瘤細胞血行轉移過程中的EMT進行觀察，因此少有針對胰腺癌EMT全程的研究。而循環(huán)腫瘤細胞(Circulating tumor cell，CTC)除可作為“液體活檢”之外，因

2、其產(chǎn)生與EMT直接相關也被認為是研究循環(huán)血中EMT的重要工具，使得針對胰腺癌原位腫瘤-外周血腫瘤細胞-轉移灶的EMT全程研究成為可能。
　　目的:
　　1.評估胰腺癌CTC作為“液體活檢”的臨床應用前景。
　　2.通過比較胰腺癌原位腫瘤、外周血CTC和轉移淋巴結中上皮和間質(zhì)標志物的表達對胰腺癌EMT的全程進行解析。
　　方法:
　　1.采用SET-iFISH法對胰腺癌患者外周血CTC進行分類計數(shù)及動態(tài)監(jiān)測，

3、分析不同分類計數(shù)與手術、化療、復發(fā)轉移、臨床病理及預后的相關性。
　　2.采用芯片法對胰腺癌患者外周血CTC進行上皮標志物E-cadherin和間質(zhì)標志物Vimentin的染色，分析不同EMT分類情況與手術、化療、臨床病理的相關性。
　　3.應用免疫組化對確診胰腺導管腺癌患者的原位腫瘤及轉移淋巴結中上皮標志物E-cadherin和間質(zhì)標志物Vimentin進行染色及評分，分析EMT水平與臨床病理及預后的相關性;并通過與芯片法

4、中CTC染色情況比較對胰腺癌EMT全程進行解析。
　　結果:
　　1.SET-iFISH法:研究共對27名研究對象（20名胰腺導管腺癌患者、5名胰腺良性占位及2名健康受試者）的63例血標本進行檢測。CTC分類計數(shù)與手術、化療、臨床病理特征呈現(xiàn)一定變化趨勢，而術前檢測到CTM的患者具有更短的OS(p=0.027)和PFS(p=0.015)。在原位腫瘤及胰腺癌腹水轉移細胞中以上皮型細胞為主，而外周血CTC中絕大多數(shù)為非上皮型細胞

5、。
　　2.芯片法:研究共對24名研究對象（22名胰腺導管腺癌患者及2名健康受試者）的46例血標本進行檢測，并對CTC中EMT情況(E、E＞M、E=M、E＜M和M型)進行分類計數(shù)。手術可導致CTC總數(shù)(p=0.005)及M型CTC(p=0.000)計數(shù)下降，而化療則導致E型CTC(p=0.004)計數(shù)下降，進而導致間質(zhì)為主型CTC比例則呈上升趨勢。CTC總數(shù)與臨床分期、T分期及遠處轉移相關(p＜0.05)，但CTC中上皮和間質(zhì)比例

6、與侵襲轉移等臨床病理特征間相關性不具有統(tǒng)計學意義。
　　3.研究共納入27名確診胰腺導管腺癌的患者，其癌組織中E-cadherin的IHC評分與分化程度(p=0.016)呈正相關，而Vimentin與分化程度負相關(p=0.016)。E＞M組和E≤M組平均無病生存期分別為627.5±49.0天和337.1±80.9天，差異具有統(tǒng)計學意義（x2=4.867，p=0.027）。胰腺癌癌組織中E-cadherin表達下降而Vimenti

7、n表達升高。胰腺癌原位腫瘤及轉移淋巴結中以E-cadherin表達為主，而外周血CTC上上皮及間質(zhì)比例約各占50％。
　　結論:
　　1.液體活檢:CTM與胰腺癌不良預后密切相關;胰腺癌CTC分類計數(shù)與臨床分期、T分期及遠處轉移相關，并隨手術、化療、復發(fā)轉移成一定變化趨勢。
　　2.胰腺癌EMT全程:胰腺癌原位腫瘤-外周血CTC-轉移淋巴結呈現(xiàn)EMT/MET變化趨勢，EMT與化療及不良預后相關，但其與侵襲轉移的關系仍需