優(yōu)化肝移植供肝灌流液的基礎(chǔ)研究.pdf

1、目的：
　　肝移植對(duì)于終末期肝病是一個(gè)常規(guī)的有效治療手段，雖然有較好的療效，但是仍然存在很大的挑戰(zhàn)。其中供肝短缺就是一個(gè)主要的問題。所以擴(kuò)大供肝范圍，如何合理利用邊緣供肝，提高供肝質(zhì)量成為一個(gè)緊急迫切的事情。眾多實(shí)驗(yàn)證明供肝通過機(jī)器灌注后可以有效改善供肝質(zhì)量，提高移植術(shù)后生存率。所以現(xiàn)在尋找一種可以增加供肝保存時(shí)間以及減少供肝氧自由基、炎癥介質(zhì)的灌流液成為當(dāng)務(wù)之急。本實(shí)驗(yàn)通過對(duì)臨床常用灌流液HTK液中增加綠茶多酚以及溶解氧對(duì)大鼠的

2、肝臟進(jìn)行機(jī)器灌注，來研究新型灌流液對(duì)于供肝的保護(hù)作用。
　　方法：
　　綠茶多酚+HTK液改良灌流液:將SD大鼠隨機(jī)分配成一下兩組:(1) HTK對(duì)照試驗(yàn)組(n=6);(2)HTK+綠茶多酚(GTP)(60μg/ml)(n=6)。O2+HTK液改良灌流液:將SD大鼠隨機(jī)分配成一下兩組:(1)HTK對(duì)照試驗(yàn)組(n=6）;(2)HTK灌流液中持續(xù)充氣（95％氧氣和5％二氧化碳混合氣體）(n=6)。對(duì)大鼠肝臟進(jìn)行門靜脈以及膽管插管

3、，之后從大鼠中取下，通過門靜脈導(dǎo)管與機(jī)器灌流系統(tǒng)連接，以5rpm的流速進(jìn)行灌注。在7個(gè)時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行灌流液的收集(0h，1h，3h，6h，8h，10h，12h)來檢測(cè)肝功能(谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)，谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)，乳酸脫氫酶(LDH))以及電解質(zhì)(Na，K，Cl)。同時(shí)我們保留肝組織的一部分為了之后的組織學(xué)研究（HE染色）。收集新鮮的肝組織樣本保存于-80℃為了之后的研究(丙二醛(MDA)，髓過氧化物酶(MPO))。
　　結(jié)果：<

4、br>　　通過HTK對(duì)照組以及GTP實(shí)驗(yàn)組的比較，ALT(8h，10h:p＜0.05;12h:p＜0.01)，AST(10h:p＜0.05;12h:p＜0.01),LDH(1h,3h,6h,8h,10h,12h:p＜0.05)MPO(p＜0.05),MDA(p＜0.01)在對(duì)照組中普遍高于實(shí)驗(yàn)組。病理學(xué)方面HTK對(duì)照組炎細(xì)胞浸潤明顯，肝竇及中央靜脈充血明顯。兩組干濕重比沒有明顯差異。HTK對(duì)照組與HTK+O2實(shí)驗(yàn)組比較:ALT(6h，8