初治骨髓增生異常綜合征HERG鉀通道的表達(dá)特點(diǎn)及臨床意義.pdf

1、目的：HERG鉀離子通道是一種電壓門控型的離子通道，它固有表達(dá)于心肌細(xì)胞、神經(jīng)元等人體組織細(xì)胞，參與調(diào)節(jié)動(dòng)作電位復(fù)極化。數(shù)據(jù)顯示HERG鉀通道在多種腫瘤細(xì)胞上異常高表達(dá)，而對(duì)應(yīng)正常的細(xì)胞上無或低表達(dá)。在急性髓性白血?。ˋML）等非實(shí)體瘤中，HERG鉀通道通過促進(jìn)癌細(xì)胞增殖，遷移，血管生成和耐藥，對(duì)腫瘤進(jìn)展起到了促進(jìn)作用。骨髓增生異常綜合征（MDS）由于高風(fēng)險(xiǎn)向AML轉(zhuǎn)化，被認(rèn)為是一種前AML（pre-AML）狀態(tài)。這些年來，人們發(fā)現(xiàn)MD

2、S和AML有許多共同的分子遺傳學(xué)異常。然而，初治MDS患者HERG鉀離子通道的表達(dá)特點(diǎn)及其對(duì)MDS發(fā)生發(fā)展的影響等問題尚未見報(bào)道。為此，本實(shí)驗(yàn)探討了初治MDS中骨髓CD34+CD38-細(xì)胞HERG蛋白的表達(dá)特點(diǎn)，分析了HERG鉀通道蛋白的水平和MDS患者臨床資料之間的關(guān)系及其意義，并初步探索HERG鉀離子通道在MDS中的作用。
　　方法：本實(shí)驗(yàn)研究對(duì)象為2014年三月至2015年二月期間在華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬協(xié)和醫(yī)院血液科收

3、集的76例骨髓標(biāo)本，其中包括36例MDS初治患者，20例正常對(duì)照和20名AML初治患者骨髓標(biāo)本（陽性對(duì)照）。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)表達(dá)HERG鉀離子通道的CD34+CD38-細(xì)胞占總CD34+CD38-細(xì)胞的比例，各組間比較分析其差異；同時(shí)結(jié)合臨床數(shù)據(jù)分析HERG鉀離子通道對(duì)于MDS患者的臨床意義，探討該通道蛋白與 WHO（2008）分型，血紅蛋白，中性粒細(xì)胞及血小板水平，染色體核型分析、IPSS預(yù)后積分的相關(guān)性；培養(yǎng)MDS細(xì)胞系SKM-1，運(yùn)

4、用CCK-8增殖實(shí)驗(yàn)及流式細(xì)胞術(shù)，觀察E-4031（HERG鉀離子通道特異性阻斷劑）作用于SKM-1前后其增殖、凋亡及周期的變動(dòng)特點(diǎn)。
　　結(jié)果：MDS病例骨髓中CD34+CD38-細(xì)胞HERG鉀離子通道的表達(dá)比率顯著高于正常組（p＜0.01），且低于AML組（p＜0.05）。分析MDS患者臨床資料，我們發(fā)現(xiàn)表達(dá)HERG鉀通道的CD34+CD38-細(xì)胞比例在MDS各亞型組中存在差別（p＜0.01），且其比例隨著亞型組惡性程度增加而

5、升高；表達(dá)HERG鉀通道蛋白的CD34+CD38-細(xì)胞比例與中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)呈顯著負(fù)相關(guān)（ p＜0.05），與血小板水平呈顯著的負(fù)相關(guān)性（p＜0.01）；在染色體核型分析中，預(yù)后不良核型組表達(dá)HERG鉀通道的CD34+CD38-細(xì)胞比例要顯著高于預(yù)后良好核型組（p＜0.05）；隨著 IPSS預(yù)后積分的上升，MDS患者表達(dá) HERG鉀通道 CD34+CD38-細(xì)胞比例隨之增加（p＜0.01）。此外，我們發(fā)現(xiàn)HERG鉀離子通道特異性阻斷劑E-

6、4031作用于SKM-1后，細(xì)胞的增殖顯著減弱，呈時(shí)間與劑量依耐性（p＜0.01），而對(duì)凋亡和周期的影響無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　結(jié)論：MDS骨髓中表達(dá)HERG鉀通道的CD34+CD38-細(xì)胞比例與對(duì)照組相比顯著升高，且其與MDS惡性程度呈正相關(guān)，與患者不良預(yù)后密切相關(guān)，表明HERG鉀離子通道有可能對(duì)MDS發(fā)生、發(fā)展有重要影響；且阻斷SKM-1細(xì)胞膜上的HERG鉀離子通道能顯著抑制SKM-1細(xì)胞的增殖，提示靶向阻斷HERG鉀通道有可能成