基于鉑蓄積機制探討黃芪桂枝五物湯對奧沙利鉑致周圍神經(jīng)病變的防治作用.pdf

1、目的：
　　通過觀察O-IPN模型大鼠一般情況、機械性刺激敏感程度、背根神經(jīng)節(jié)細胞形態(tài)學(xué)改變，背根神經(jīng)節(jié)鉑含量及鉑轉(zhuǎn)運蛋白OCT2和ATP7A的表達情況，探討黃芪桂枝五物湯對奧沙利鉑神經(jīng)毒性的干預(yù)作用及機制。
　　方法：
　　選用42只雌性Wistar大鼠隨機分為4組，空白組、模型組、西咪替丁(CIM)組和黃芪桂枝五物湯（中藥）組。適應(yīng)性喂養(yǎng)7天后，除空白組(n=6)予以腹腔注射5％葡萄糖注射液2ml/kg外，其余各組

2、(n=12)按照2ml/kg(5mg/kg)的劑量予以腹腔注射奧沙利鉑，每周2次，共4周。同時，空白組、模型組予以0.9％NaCl溶液灌胃1ml/次，每日1次。CIM組予以3ml/kg(30mg/kg)西咪替丁腹腔注射，每日1次，OXA給藥當天，西咪替丁于給藥前1小時腹腔注射。中藥組予以黃芪桂枝五物湯湯劑2.80g/ml，10ml/kg灌胃，每日1次，OXA給藥當天，中藥于給藥前1小時灌胃。持續(xù)性給藥至第28天。每周進行2次體重稱量，2

3、次機械性疼痛閾值檢測，每日觀察大鼠給藥后反應(yīng)、飲食、排泄物等。第29天解剖各組大鼠，取L4-5雙側(cè)背根神經(jīng)節(jié)。組織切片經(jīng)尼氏染色后在油鏡下觀察背根神經(jīng)節(jié)細胞及核仁形態(tài)，運用ICP-MS法對背根神經(jīng)節(jié)內(nèi)的鉑含量進行定量檢測，進行PCR實驗對背根神經(jīng)節(jié)中鉑轉(zhuǎn)運蛋白OCT2和ATP7A的mRNA表達情況進行檢測。
　　結(jié)果：
　　通過大鼠行為學(xué)觀察、機械性刺激實驗以及細胞形態(tài)學(xué)檢測證實O-IPN模型制備成功。結(jié)果表明，使用OXA能

4、夠顯著增加大鼠對機械性刺激的敏感度(P＜0.01)，黃芪桂枝五物湯或西咪替丁可在一定程度上緩解大鼠對機械性刺激過度敏感表現(xiàn)，但這一效果短期內(nèi)并不顯著，大約在給藥第三周后效果逐漸明顯。細胞形態(tài)學(xué)觀察結(jié)果顯示，使用奧沙利鉑后背根神經(jīng)元出現(xiàn)細胞體積縮小，核仁縮小或分裂，尼氏體淡染、紊亂等形態(tài)學(xué)改變，使用黃芪桂枝五物湯和西咪替丁均能夠改善奧沙利鉑導(dǎo)致的大鼠背根神經(jīng)元細胞及核仁體積縮小、尼氏體結(jié)構(gòu)改變。經(jīng)背根神經(jīng)節(jié)內(nèi)鉑含量檢測發(fā)現(xiàn)，使用OXA后背

5、根神經(jīng)節(jié)內(nèi)可檢測出較高含量的鉑，而在黃芪桂枝五物湯或西咪替丁干預(yù)下，背根神經(jīng)節(jié)內(nèi)鉑含量均顯著降低(P＜0.05)。PCR實驗結(jié)果表明:在OXA作用下，大鼠背根神經(jīng)節(jié)Oct2的表達略升高，Atp7a的表達稍降低，而在黃芪桂枝五物湯干預(yù)下則出現(xiàn)了相反的結(jié)果，即Oct2的表達略降低，Atp7a的表達明顯升高(P＜0.05)，有趣的是，西咪替丁干預(yù)后的結(jié)果卻是Oct2表達偏高，Atp7a的表達則基本不變。
　　結(jié)論：
　　黃芪桂枝五