吲哚胺2,3-雙加氧酶2對小鼠黑色素瘤生長的影響及其在腫瘤治療中的應(yīng)用研究.pdf

1、分類號：密級：UDC：學(xué)號：356529212002南昌大學(xué)博士研究生學(xué)位論文吲哚胺吲哚胺2，3雙加氧酶雙加氧酶2對小鼠黑色素瘤生長的影響及其在腫瘤治療中的應(yīng)用研究對小鼠黑色素瘤生長的影響及其在腫瘤治療中的應(yīng)用研究Theimpactsofindoleamine23dioxygenase2expressiononmurinemelanomagrowthitsapplicationintumtherapy劉燕玲劉燕玲培養(yǎng)單位（院、系）：南昌

2、大學(xué)醫(yī)學(xué)院指導(dǎo)教師姓名、職稱：閔衛(wèi)平教授申請學(xué)位的學(xué)科門類：醫(yī)學(xué)學(xué)科專業(yè)名稱：臨床醫(yī)學(xué)論文答辯日期：2016年6月答辯委員會主席：程曉曙評閱人:___________________________2016年5月摘要II摘要第一部分第一部分:IDO2表達(dá)對黑色素瘤細(xì)胞表達(dá)對黑色素瘤細(xì)胞B16BL6生物學(xué)行為的影響生物學(xué)行為的影響目的目的：研究吲哚胺2，3雙加氧酶2(IDO2)表達(dá)對小鼠黑色素瘤細(xì)胞生物學(xué)行為的影響。方法：方法：采用IDO

3、2siRNA沉默小鼠黑色素腫瘤細(xì)胞株B16BL6內(nèi)IDO2的表達(dá)后，qPCR檢測IDO2mRNA的表達(dá)水平，Westernblot法檢測IDO2蛋白的表達(dá)水平，MTT法檢測B16BL6細(xì)胞增殖，流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡及細(xì)胞周期，Ehrlich’s法檢測細(xì)胞內(nèi)犬尿氨酸生成水平，NADNADH試劑盒檢測細(xì)胞內(nèi)NAD水平，H2DCFDA染色檢測細(xì)胞內(nèi)活性氧水平。結(jié)果：結(jié)果：實時熒光定量PCR法及Westernblot法結(jié)果顯示，沉默小鼠黑色素

4、瘤細(xì)胞系B16BL6中IDO2基因后，其mRNA以及蛋白的表達(dá)水平均顯著下降，沉默效率達(dá)80%以上；MTT結(jié)果顯示，沉默IDO2基因后的B16BL6細(xì)胞增殖能力受到明顯抑制；流式細(xì)胞術(shù)檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn)，IDO2基因沉默后B16BL6細(xì)胞的G0G1期細(xì)胞比例明顯增加，而S期和G2M期細(xì)胞比例則明顯降低，其凋亡發(fā)生率明顯增加；Ehrlich’s法結(jié)果顯示IDO2基因沉默減少了細(xì)胞內(nèi)犬尿氨酸生成；IDO2基因沉默后NAD生成減少，同時細(xì)胞內(nèi)活性氧