MALAT1 mRNA在原發(fā)性肝癌組織中的表達(dá)及其臨床意義.pdf

1、背景:肝細(xì)胞癌（Hepatocellular carcinoma，HCC）作為肝原發(fā)性惡性腫瘤，具有發(fā)病率及病死率高，預(yù)后差的特點(diǎn)。多數(shù)早期HCC患者通過手術(shù)可以獲益，但術(shù)后復(fù)發(fā)是嚴(yán)重制約HCC患者遠(yuǎn)期療效的瓶頸。所以尋找一個(gè)有效預(yù)測(cè)患者復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)的生物學(xué)指標(biāo)極為重要。MALAT1（Metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript1），也稱肺腺癌轉(zhuǎn)移相關(guān)轉(zhuǎn)錄本1，作為1ncRNA

2、s其中一員，廣泛表達(dá)于多種正常組織，并具有組織特異性。然而MALAT1在多種惡性腫瘤組織及血漿中也被發(fā)現(xiàn)異常表達(dá)，其表達(dá)水平與腫瘤形成、發(fā)展、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及預(yù)后密切相關(guān)。但有關(guān)MALAT1在肝癌組織中的研究，尤其與臨床病理特征及患者預(yù)后的報(bào)道較少。
　　目的:探討MALAT1在原發(fā)性肝細(xì)胞癌組織的表達(dá)情況以及MALAT1的表達(dá)水平與HCC患者臨床病理特征之間的關(guān)系，分析MALAT1的表達(dá)與HCC患者根治術(shù)后不同復(fù)發(fā)時(shí)間的相關(guān)性，為尋找

3、可用于評(píng)估肝癌患者預(yù)后的生物學(xué)標(biāo)志物提供臨床依據(jù)。
　　方法:采用Trizol法提取組織中的總RNA，并對(duì)RNA進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄。通過采用qRT-PCR方法檢測(cè)73例原發(fā)性肝細(xì)胞癌患者根治術(shù)切除的癌組織以及21例HCC癌旁組織中MALAT1 mRNA的表達(dá)水平，以GAPDH為內(nèi)參照，將MALAT1的mRNA實(shí)際表達(dá)量與GAPDHmRNA實(shí)際表達(dá)量比較，獲得MALAT1的相對(duì)表達(dá)量數(shù)值。MALAT1 mRNA的表達(dá)水平與HCC臨床病理特征

4、之間的關(guān)系應(yīng)用Mann-Whitne檢驗(yàn)進(jìn)行分析;P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。利用單因素分析MALAT1 mRNA的表達(dá)水平與HCC根治術(shù)后患者不同復(fù)發(fā)時(shí)間的關(guān)系。
　　結(jié)果:
　　1.MALAT1擴(kuò)增曲線與溶解曲線
　　MALAT1擴(kuò)增曲線可見曲線呈“S”型，光滑，有明顯擴(kuò)增期和平臺(tái)期。MALAT1溶解曲線呈單峰，未見雜峰，提示MALAT1純度良好，溶解溫度為80.96℃。
　　2、實(shí)時(shí)熒光定量PCR測(cè)定結(jié)

5、果
　　在所有HCC癌及癌旁組織標(biāo)本中，MALAT1均呈不同程度表達(dá)。在73例HCC癌組織中，MALAT1mRNA的表達(dá)水平顯著低于癌旁組織中的表達(dá)水平，中位值3.15(1.46，6.63) VS17.45(8.77，22.15)，組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=2.547，P＜0.001)。
　　3、HCC組織中，MALAT1mRNA表達(dá)水平與臨床病理特征的關(guān)系
　　MALAT1mRNA表達(dá)水平與HCC腫塊大小、術(shù)前AF

6、P以及合并肝硬化有關(guān)。腫瘤最大直徑＞5cm組MALAT1mRNA相對(duì)表達(dá)量顯著高于直徑≤5cm組的表達(dá)，兩者之間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=-2.611，P=0.009）。MALAT1mRNA表達(dá)水平在術(shù)前AFP的不同表達(dá)量間具有顯著性差異(Z=6.201，P=0.045)。其中，AFP＞400μ g/L的HCC組MALAT1mRNA的表達(dá)顯著高于40＜AFP≤400μg/L組，40＜AFP≤400μg/L組MALAT1mRNA的表達(dá)顯著

7、高于AFP≤40μg/L，提示隨著術(shù)前AFP表達(dá)量的增加，MALAT1的表達(dá)水平增高。在合并肝硬化HCC組織中，MALAT1 mRNA的表達(dá)水平為3.91(1.9443，9.6541)，顯著高于無合并肝硬化HCC的表達(dá)水平2.08(1.2854，3.3997)，兩組之間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=-2.351，P=0.019）。
　　MALAT1表達(dá)水平在不同年齡、性別、民族、煙酒史、家族史、肝炎病史，以及不同水平的ALT、AST、

8、TB、腫塊數(shù)目、有無包膜、血管侵犯、組織學(xué)分級(jí)、TNM分期、BCLC分期等臨床病理特征之間的差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。
　　4、MALAT1mRNA的表達(dá)與HCC術(shù)后不同復(fù)發(fā)時(shí)間的關(guān)系
　　73例HCC患者中，出現(xiàn)術(shù)后復(fù)發(fā)44例，未出現(xiàn)復(fù)發(fā)29例。根治術(shù)后的HCC患者中，MALAT1mRNA表達(dá)水平的差異在不同復(fù)發(fā)時(shí)間段具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=9.437，P=0.028)。其中，根治術(shù)后6個(gè)月內(nèi)復(fù)發(fā)的患者M(jìn)ALAT1m

9、RNA表達(dá)水平最低，根治術(shù)后12～18m出現(xiàn)復(fù)發(fā)的患者其MALAT1mRNA表達(dá)水平最高，提示MALAT1mRNA的表達(dá)水平與HCC根治術(shù)后復(fù)發(fā)時(shí)間有關(guān)，但MALAT1在原發(fā)性肝癌術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移機(jī)制中所起的作用值得進(jìn)一步研究。
　　結(jié)論:
　　1.MALAT1在癌旁組織中的表達(dá)顯著高于癌組織。
　　2.MALAT1的表達(dá)水平在術(shù)前APF＞400μg/L組顯著增高。
　　3.在腫瘤大?。?cm組MALAT1的表達(dá)水平