硫化氫對(duì)燒傷大鼠體外培養(yǎng)皮膚巨噬細(xì)胞MAPK信號(hào)傳導(dǎo)通路ERK、JNK及p38蛋白作用的影響.pdf

1、目的：
　　探究H2S對(duì)燒傷大鼠體外培養(yǎng)皮膚巨噬細(xì)胞MAPK信號(hào)傳導(dǎo)通路ERK、JNK及p38蛋白作用的影響。
　　方法：
　　將大鼠背部創(chuàng)面皮膚巨噬細(xì)胞當(dāng)作實(shí)驗(yàn)對(duì)象，隨機(jī)挑選30只健康的SD大鼠（雌雄不限），其中5只正常飼養(yǎng)，余下25只大鼠行燒傷造模后喂養(yǎng)，從正常飼養(yǎng)的5只大鼠中選1只設(shè)為正常對(duì)照組，從燒傷大鼠中選12只再隨機(jī)分為4組（每組3只）設(shè)為實(shí)驗(yàn)對(duì)照組（燒傷對(duì)照組，NaHS（H2S供體）組1h、6h、12h，

2、格列本脲（K+通道阻滯劑）組1h、6h、12h，NaHS+格列本脲組1h、6h、12h。正常對(duì)照組不做處理，余各組大鼠背部全部進(jìn)行深I(lǐng)I°5％TBSA損傷處理，分離背部創(chuàng)面皮膚基底巨噬細(xì)胞至78個(gè)培養(yǎng)瓶中，體外培養(yǎng)穩(wěn)定后，正常對(duì)照組及燒傷對(duì)照組均加入200ul的PBS液，NaHS組中將終濃度調(diào)整為200umol/L的NaHS加入到培養(yǎng)基中，格列本脲組中將終濃度調(diào)整為200umol/L的GLBN加入到培養(yǎng)基中，NaHS+格列本脲組中加入相

3、同終濃度為200umol/L的NaHS和格列本脲，以上每組作用時(shí)間均設(shè)定為1h、6h、12h。分別在對(duì)應(yīng)時(shí)間點(diǎn)對(duì)ERK、JNK、p38蛋白進(jìn)行Western Blot免疫印跡分析。
　　結(jié)果：
　　1、各組間ERK蛋白表達(dá)量之間比較：
　?、贌齻麑?duì)照組與正常對(duì)照組ERK蛋白表達(dá)量差別之間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　?、谠谕粫r(shí)相點(diǎn)，NaHS組與各組別ERK蛋白表達(dá)量差別之間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05

4、）。
　?、跱aHS+GLBN組與GLBN組ERK蛋白表達(dá)量差異比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　?、蹽LBN組與燒傷對(duì)照組ERK蛋白表達(dá)量差別之間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　2、各組間JNK蛋白表達(dá)量之間比較：
　?、贌齻麑?duì)照組與正常對(duì)照組JNK蛋白表達(dá)量差別之間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　②在同一時(shí)間點(diǎn)，NaHS組與各組別 JNK蛋白表達(dá)量差別之間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.0

5、5）。
　?、跱aHS+GLBN組與GLBN組JNK蛋白表達(dá)量差異比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　?、蹽LBN組與燒傷對(duì)照組JNK蛋白表達(dá)量差別之間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　3、各組間p38蛋白表達(dá)量之間比較：
　?、贌齻麑?duì)照組與正常對(duì)照組p38蛋白表達(dá)量差別之間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　?、谠谕粫r(shí)相點(diǎn)，NaHS組與各組別p38蛋白表達(dá)量差別之間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.0

6、5）。
　　③NaHS+GLBN組與GLBN組p38蛋白表達(dá)量差異比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　④GLBN組與燒傷對(duì)照組p38蛋白表達(dá)量差別之間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　結(jié)論：
　?、贌齻驟RK表達(dá)減少而JNK和p38表達(dá)增多；
　　②燒傷后給予微量的H2S使ERK蛋白相對(duì)表達(dá)量升高，JNK和p38蛋白相對(duì)表達(dá)量下降；
　?、鄹窳斜倦迥軌蛞种?K+通道開放，使 ERK蛋白相對(duì)