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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
探究H2S對(duì)燒傷大鼠體外培養(yǎng)皮膚巨噬細(xì)胞MAPK信號(hào)傳導(dǎo)通路ERK、JNK及p38蛋白作用的影響。
方法:
將大鼠背部創(chuàng)面皮膚巨噬細(xì)胞當(dāng)作實(shí)驗(yàn)對(duì)象,隨機(jī)挑選30只健康的SD大鼠(雌雄不限),其中5只正常飼養(yǎng),余下25只大鼠行燒傷造模后喂養(yǎng),從正常飼養(yǎng)的5只大鼠中選1只設(shè)為正常對(duì)照組,從燒傷大鼠中選12只再隨機(jī)分為4組(每組3只)設(shè)為實(shí)驗(yàn)對(duì)照組(燒傷對(duì)照組,NaHS(H2S供體)組1h、6h、12h,
2、格列本脲(K+通道阻滯劑)組1h、6h、12h,NaHS+格列本脲組1h、6h、12h。正常對(duì)照組不做處理,余各組大鼠背部全部進(jìn)行深I(lǐng)I°5%TBSA損傷處理,分離背部創(chuàng)面皮膚基底巨噬細(xì)胞至78個(gè)培養(yǎng)瓶中,體外培養(yǎng)穩(wěn)定后,正常對(duì)照組及燒傷對(duì)照組均加入200ul的PBS液,NaHS組中將終濃度調(diào)整為200umol/L的NaHS加入到培養(yǎng)基中,格列本脲組中將終濃度調(diào)整為200umol/L的GLBN加入到培養(yǎng)基中,NaHS+格列本脲組中加入相
3、同終濃度為200umol/L的NaHS和格列本脲,以上每組作用時(shí)間均設(shè)定為1h、6h、12h。分別在對(duì)應(yīng)時(shí)間點(diǎn)對(duì)ERK、JNK、p38蛋白進(jìn)行Western Blot免疫印跡分析。
結(jié)果:
1、各組間ERK蛋白表達(dá)量之間比較:
?、贌齻麑?duì)照組與正常對(duì)照組ERK蛋白表達(dá)量差別之間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
?、谠谕粫r(shí)相點(diǎn),NaHS組與各組別ERK蛋白表達(dá)量差別之間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05
4、)。
?、跱aHS+GLBN組與GLBN組ERK蛋白表達(dá)量差異比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
?、蹽LBN組與燒傷對(duì)照組ERK蛋白表達(dá)量差別之間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
2、各組間JNK蛋白表達(dá)量之間比較:
?、贌齻麑?duì)照組與正常對(duì)照組JNK蛋白表達(dá)量差別之間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
②在同一時(shí)間點(diǎn),NaHS組與各組別 JNK蛋白表達(dá)量差別之間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.0
5、5)。
?、跱aHS+GLBN組與GLBN組JNK蛋白表達(dá)量差異比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
?、蹽LBN組與燒傷對(duì)照組JNK蛋白表達(dá)量差別之間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
3、各組間p38蛋白表達(dá)量之間比較:
?、贌齻麑?duì)照組與正常對(duì)照組p38蛋白表達(dá)量差別之間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
?、谠谕粫r(shí)相點(diǎn),NaHS組與各組別p38蛋白表達(dá)量差別之間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.0
6、5)。
③NaHS+GLBN組與GLBN組p38蛋白表達(dá)量差異比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
④GLBN組與燒傷對(duì)照組p38蛋白表達(dá)量差別之間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
結(jié)論:
?、贌齻驟RK表達(dá)減少而JNK和p38表達(dá)增多;
②燒傷后給予微量的H2S使ERK蛋白相對(duì)表達(dá)量升高,JNK和p38蛋白相對(duì)表達(dá)量下降;
?、鄹窳斜倦迥軌蛞种?K+通道開放,使 ERK蛋白相對(duì)
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