基于p38 MAPK信號(hào)傳導(dǎo)通路健骨方干預(yù)大鼠膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、膝骨性關(guān)節(jié)炎(knee osteoarthritis,KOA)是一種以骨關(guān)節(jié)軟骨退變，軟骨下骨重建（增厚，骨萎縮，骨囊腫），韌帶和半月板變性，關(guān)節(jié)囊肥大為特征的退行性骨關(guān)節(jié)疾病。中老年人中發(fā)病率和患病率居高不下，給其身體上和精神上帶來(lái)諸多損害，嚴(yán)重者給日常生活帶來(lái)諸多困擾，給社會(huì)、家庭增添了一定的負(fù)擔(dān)。西醫(yī)方法主要包括藥物口服、物理治療、關(guān)節(jié)腔注射、手術(shù)治療等治療方案。但是目前沒(méi)有一種令人十分滿意的治療方法。健骨方為湖北中醫(yī)大師李同生教

2、授驗(yàn)方，能促進(jìn)關(guān)節(jié)面的修復(fù)，采用健骨方治療早中期KOA取得了較好的效果。前期兔實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ脱芯拷Y(jié)果表明健骨方能夠減輕關(guān)節(jié)炎癥，改善關(guān)節(jié)軟骨功能，但其確切的作用機(jī)理有待深入研究。本項(xiàng)目圍繞健骨方治療鼠膝KOA前后組織形態(tài)、p38 MAPK的表達(dá)、Ⅰ、Ⅱ型膠原降解的過(guò)程，探討健骨方治療 KOA影響 p38MAPK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)延緩關(guān)節(jié)軟骨退變的作用機(jī)制。
　　目的：觀察健骨方干預(yù)KOA模型對(duì)膝骨關(guān)節(jié)軟骨的影響；健骨方干預(yù)KOA模型對(duì)軟骨細(xì)胞中Ⅰ

3、、Ⅱ型膠原分泌表達(dá)的影響；健骨方干預(yù)KOA模型對(duì)p38絲裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)表達(dá)的影響。
　　方法：將雌雄大鼠采用隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分成四組，正常組即為假手術(shù)組+生理鹽水灌胃、模型組即為手術(shù)組+生理鹽水灌胃、健骨方組即為手術(shù)組+健骨方灌胃、陽(yáng)性對(duì)照組為手術(shù)組+塞來(lái)昔布口服。治療3個(gè)月后，斷頸處死正常組、健骨方組、模型組及陽(yáng)性對(duì)照組大鼠。分別取出右側(cè)后肢膝關(guān)節(jié)軟骨，鏡下觀察上述各組關(guān)節(jié)軟骨形態(tài)學(xué)改變；用RT-PCR法分

4、別檢測(cè)關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞中的Ⅰ、Ⅱ型膠原mRNA的表達(dá)，以了解健骨方對(duì)Ⅰ、Ⅱ型膠原的影響；用Western blot法檢測(cè)關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞中p38的含量的變化，了解健骨方對(duì)p38 MAPK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中蛋白激酶的影響。
　　結(jié)果：電鏡結(jié)果我們發(fā)現(xiàn)模型組關(guān)節(jié)軟骨組織紅染表明壞死，而健骨方組關(guān)節(jié)軟骨沒(méi)有像模型組壞死而是關(guān)節(jié)軟骨粗糙不平，形成潰瘍，在少量的壞死區(qū)仍可見(jiàn)軟骨基質(zhì)。病理改變 Mankin,s評(píng)分結(jié)果示：模型組與正常組、健骨方組與模型組

5、比較差異都有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05,p=0.000）；健骨方能夠降低關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞中的Ⅰ型膠原mRNA的表達(dá)，增加Ⅱ型膠原分泌表達(dá)；p38 MAPK磷酸化產(chǎn)物在各個(gè)組中均有表達(dá)，各組相比（p<0.05,p=0.007），有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說(shuō)明骨性關(guān)節(jié)炎發(fā)病過(guò)程中確實(shí)引起了 p38絲裂原活化蛋白激酶信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的激活。健骨方組與模型組相比，健骨方組p38 MAPK磷酸化產(chǎn)物表達(dá)呈下降趨勢(shì)。
　　結(jié)論：健骨方對(duì) Hulth法建立的膝骨關(guān)節(jié)