分化型甲狀腺癌患者NIS基因突變的研究.pdf

1、目的：
　　甲狀腺癌近年來發(fā)病率增長迅速，已成為增長較快的實體腫瘤之一，分化型甲狀腺癌（differentiated thyroid carcinomas，DTC）占甲狀腺癌（thyroid carcinomas，TC）的85-90%，而且分化型甲狀腺癌的增長速度占甲狀腺癌增速的絕大部分。隨著分子生物學的發(fā)展，甲狀腺癌在分子水平的研究日益受到人們的重視，研究發(fā)現(xiàn)甲狀腺癌與Braf基因突變、Ret/PTC重組、Ras點突變、PAX8

2、/PPARγ基因重組以及Na+/I-Symporter(NIS)基因突變具有一定關系。NIS基因在甲狀腺攝碘功能中起著關鍵作用，在甲狀腺癌分化過程中，可能由于其去分化作用引起NIS基因突變，導致攝碘功能喪失，在放射碘治療療效較差方面起到一定的作用。本試驗擬在研究并分析分化型甲狀腺癌患者 NIS基因突變的類型和特點，并對其基因類型-表現(xiàn)型的關系進行初步探討，為 DTC患者的基因診斷和基因治療及預后分析提供一定的理論依據(jù)。
　　方法：

3、
　　按照僅有甲狀腺腫瘤病史，無其他惡性腫瘤病史，術前未行甲狀腺放射治療及相關治療的選擇標準，選取于2016.04-2016.07在青島大學附屬醫(yī)院行甲狀腺癌手術治療，并經(jīng)兩位病理醫(yī)師確認的100例 DTC患者作為研究對象，從患者癌組織及正常組織中提取基因組 DNA，采用PCR擴增和直接測序的方法對 NIS基因全部外顯子及一部分臨近內(nèi)含子進行基因突變的檢測。通過卡方檢驗對檢測到的基因突變的頻率進行分析，p<0.5為癌組織組和正常組

4、織組差異具有統(tǒng)計學意義的標準，通過生物信息學對所得到的基因突變進行基因突變位點危險性分析。
　　結果：
　　在1例患者中發(fā)現(xiàn)位于NIS基因第14外顯子的一個錯義突變（c.1663C＞T,p.Arg555Cys）位點，在2例患者癌組織中發(fā)現(xiàn)位于 NIS基因第10外顯子的一個同義基因突變（c.1571 C＞T, p.Leu408=）位點，在1例患者中發(fā)現(xiàn)位于NIS基因第8外顯子發(fā)現(xiàn)一個同義基因突變（c.1224C＞T,p.Leu

5、408=）位點。在編號9、13、27、35、41、42的癌組織第1內(nèi)含子發(fā)現(xiàn)一個SNP：rs740695（c.-1207C＞T）位點；在編號1號的患者癌組織第5內(nèi)含子發(fā)現(xiàn)一個SNP突變位點
　　rs185045651(c.332+52G＞A)；在編號4、18、46、61、89患者癌組織第6內(nèi)含子發(fā)現(xiàn)一個SNP突變位點rs182064161(c.839+11C＞T)；在編號10、23、24、58患者癌組織第14內(nèi)含子發(fā)現(xiàn)一個SNP突

6、變位點rs148626179(c.1767+23A＞C)；在編號31、86號患者癌組織第14內(nèi)含子同時發(fā)現(xiàn)一個SNP位點rs4808709(1767+29A＞G)。其他癌組織及全部正常組織中未發(fā)現(xiàn)基因突變。兩組組織經(jīng)卡方檢驗（P＞0.05）比較，基因突變頻率差異無統(tǒng)計學意義。
　　結論：
　　在統(tǒng)計學方面，癌組織組與正常組織基因突變頻率經(jīng)卡方檢驗，差異無統(tǒng)計學意義。在生物信息學方面，通過運用polyphen-2程序?qū)Πl(fā)現(xiàn)的錯

7、義突變（c.1663C＞T,p.Arg555Cys）進行危險度分析，運算值為1，運用SIFT評分，分值為0分，提示該突變對于NIS基因所編碼的NIS蛋白具有較大危險性。該患者是一個51歲的老年女性，術后病理示甲狀腺乳頭狀癌，腫瘤直徑0.7 cm，有頸部淋巴結轉(zhuǎn)移，癌灶呈多灶性，甲功五項未見明顯異常，基因型和表型關系仍不明顯。NIS基因突變可能與青島地區(qū)分化型甲狀腺癌的相關性不明顯，該錯義突變在甲狀腺攝碘過程中可能起到一定作用，具體功能仍