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文檔簡介
1、目的:本研究通過調(diào)控GDM孕婦和正常妊娠孕婦體外培養(yǎng)下外周血單核細(xì)胞中髓樣分化因子88(MyD88)的蛋白表達(dá)水平,檢測對(duì)比 GDM組與正常組調(diào)控前后單核細(xì)胞中蛋白(MyD88)和細(xì)胞因子(TNF-α、IL-1、IL-10)的表達(dá)水平,來研究MyD88在妊娠期糖尿病(GDM)發(fā)病機(jī)制中的作用。
方法:選取在我院內(nèi)分泌實(shí)驗(yàn)室行口服葡萄糖耐量實(shí)驗(yàn)(OGTT)的妊娠婦女,將30例OGTT異常的孕婦納入GDM組,同時(shí)選取在我院產(chǎn)科門診
2、正常產(chǎn)檢的30例孕婦納入正常組。采集所有受試者晨起空腹外周靜脈血15mL,采用密度梯度離心法分離收集外周血單核細(xì)胞。正常組和GDM組中每個(gè)樣本處理均相同,每個(gè)樣本各分為4個(gè)組,分別為未處理組(空白對(duì)照)、LPS組(加入LPS刺激)、ST2825組(加入ST2825抑制)、LPS+ST2825組(加入ST2825預(yù)處理后再加入LPS刺激)。采用蛋白印記法(Western blot,WB)檢測并比較各組單核細(xì)胞中 MyD88表達(dá)量;采用酶聯(lián)
3、免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)檢測并比較各組培養(yǎng)液中腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白介素-1(IL-1)、白介素-10(IL-10)的表達(dá)水平。
結(jié)果:(1)GDM組孕婦外周血單核細(xì)胞中MyD88蛋白表達(dá)量及血清細(xì)胞因子(TNF-α、IL-1、IL-10)的表達(dá)水平均高于正常組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。(2)體外培養(yǎng)下,正常組和GDM組組內(nèi)的蛋白比較:L
4、PS組的MyD88的表達(dá)量高于同組未處理組;ST2825組的MyD88的表達(dá)量低于同組未處理,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);LPS+ST2825組的MyD88的表達(dá)量明顯低于同組的LPS組(P<0.05)。
?。?)體外培養(yǎng)下正常組與GDM組組間的蛋白比較:GDM組各處理組MyD88的表達(dá)水平均較正常組相同處理組明顯升高(P<0.05)。
?。?)體外培養(yǎng)下,正常組和 GDM組細(xì)胞因子的比較:GDM組中未處理組和LP
5、S組中的細(xì)胞因子(TNF-α、IL-1、IL-10)的表達(dá)水平均高于正常組中未處理組及LPS組(P<0.05)。
(5)體外培養(yǎng)下,GDM組組內(nèi)細(xì)胞因子的比較:GDM組中 LPS組細(xì)胞因子(TNF-α、IL-1、IL-10)的表達(dá)水平高于其未處理組(P<0.05);ST2825組細(xì)胞因子(TNF-α、IL-1、IL-10)的表達(dá)低于其未處理組(P<0.05);LPS+ST2825組細(xì)胞因子(TNF-α、IL-1、IL-10)的
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