烏藥醇提物保護急性酒精性肝損傷的腸源性機制研究.pdf

1、背景：酒精性肝?。╝lcoholic liver disease, ALD）是嚴重危害人類健康的常見疾病之一，并呈逐年上升趨勢，迄今為止治療酒精性肝病尚無特效藥物。因此研究治療酒精性肝病的藥物及其作用機制很有必要。
　　目的：通過建立大鼠急性酒精性肝損傷模型，觀察烏藥醇提物對酒精性肝損傷的影響，進而探討其針對酒精性肝損傷腸源性機制的保護作用。
　　方法：將60只大鼠隨機分為四組：正常對照組、模型對照組、陽性對照組（思密達0.

2、6g/kg）以及烏藥醇提物組；根據(jù)不同干預(yù)劑量又將烏藥醇提物組分為烏藥醇提物組3g/kg組、烏藥醇提物2g/kg組和烏藥醇提物1g/kg組。烏藥醇提物的制備方法：取烏藥適量，加入12BV75％乙醇提取1.5h，濾取藥液，藥渣繼用10 BV乙醇提取1h，濾取藥液，合并兩次藥液，減壓回收乙醇并適當濃縮，即得烏藥醇提物。臨用前用適量純化水稀釋，使每1ml藥液相當于0.5g生藥。（1）于末次給藥后將各組大鼠置代謝籠內(nèi)，分別收集大鼠糞便（2顆每只

3、），于-80℃中保存抽提腸道菌群總DNA，進行ERIC-PCR指紋圖譜檢測，對圖譜作相似性聚類分析檢測細菌種類；（2）將各組大鼠末次給藥后禁食12h，分別于肝門靜脈和腹主動脈取血，離心制備血清，測定血清ALT、AST、T.BIL、TNF-α、IL-6、IL-8、NF-κB、ET水平；（3）迅速處死大鼠并在冰臺上摘取肝臟、胃、大腸及回盲部上方15cm處小腸，肝組織分別保存于液氮及福爾馬林中備用，小腸保存于2.5%戊二醛及福爾馬林中備用，胃

4、及大腸保存于福爾馬林中備用，采用HE染色法觀察大鼠各臟器病理學改變，采用WB法測定肝組織中TLR4、CD68、CYP2E1的表達，采用電鏡觀察小腸粘膜微絨毛的變化。
　　結(jié)果：對于急性酒精性肝損傷大鼠模型，烏藥醇提物能：1.降低血清ALT、AST、TBIL含量；2.降低血清TNF-α、IL-6、IL-8、NF-κB、ET水平；3.下調(diào)大鼠肝組織TLR4、CD68、CYP2E1表達；4.減輕大鼠肝組織病理損傷；5、降低腸道粘膜的通透