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1、建立了快速測(cè)定三角褐指藻細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)的尼羅紅熒光檢測(cè)方法,以15%的二甲基亞砜(DMSO)為滲透劑,滲透溫度35℃,尼羅紅染料用量為15μL,染色時(shí)間為5min,藻細(xì)胞密度為OD500=0.5時(shí)染色效果最好。
三角褐指藻能夠利用葡萄糖、淀粉、乙酸鈉進(jìn)行兼養(yǎng)生長(zhǎng),各種碳源的加入均有效提高了油脂的含量。低濃度的葡萄糖(0.5 g/L~1.0 g/L)能顯著促進(jìn)藻的生長(zhǎng),最高的細(xì)胞干重和油脂含量分別為0.92g/L和45.84%,
2、分別是自養(yǎng)的1.53倍和2.64倍;淀粉對(duì)藻的生長(zhǎng)沒(méi)有明顯的促進(jìn)作用;0.5 g/L的乙酸鈉對(duì)藻的生長(zhǎng)和生物量的積累有顯著的促進(jìn)作用,三角褐指藻在兼養(yǎng)培養(yǎng)時(shí)SFAs和MUFAs占總脂肪酸的比例提高。
考察了硝酸鈉、氯化銨、尿素三種氮源及其濃度對(duì)三角褐指藻生長(zhǎng)和脂肪含量的影響,氮缺乏時(shí)三角褐指藻生長(zhǎng)顯著受抑,但表現(xiàn)出油脂積累的特性,氮源的種類(lèi)和濃度對(duì)脂肪的含量影響不大;在1.0 mmol/L~8.0 mmol/L時(shí),硝酸鈉顯
3、著促進(jìn)藻生長(zhǎng),氯化銨和尿素濃度在2.1 mmol/L以下時(shí),三角褐指藻的比生長(zhǎng)速率增加,濃度的繼續(xù)增加反而抑制了藻的生長(zhǎng);三角褐指藻的細(xì)胞干重在尿素濃度為2.1 mmol/達(dá)到最高(0.637g/L);氮源的種類(lèi)及其濃度對(duì)藻的脂肪酸組成有較明顯的影響。
不同碳氮比的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,三角褐指藻對(duì)葡萄糖的利用率隨著氮濃度的增加而降低,對(duì)氯化銨的利用率隨著葡萄糖濃度的增加而降低,在低氮濃度和低糖濃度時(shí),藻對(duì)葡萄糖和氯化銨的利用率提
4、高;培養(yǎng)基中葡萄糖(g/L)/氯化銨(mmol/L)為0.5/1.0時(shí),三角褐指藻干重達(dá)到1.23 g/L,脂肪含量高達(dá)44.56%。在相同碳濃度下,脂肪酸組成隨氮濃度變化而變化。
為了減少培養(yǎng)的成本,考查了叉培養(yǎng)基中添加乙酸鈉和尿素的兼養(yǎng)培養(yǎng)方式對(duì)三角褐指藻生長(zhǎng)和脂肪積累的影響。結(jié)果表明,在乙酸鈉濃度為5.0 g/L時(shí)得到1.28 g/L的最大生物量,比對(duì)照提高了70%;而油脂含量在乙酸鈉濃度為0.5 g/L時(shí)達(dá)到最大(
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