胃萎清治療慢性萎縮性胃炎的臨床療效及作用機制研究.pdf

1、背景:
　　慢性萎縮性胃炎是慢性胃炎的一種類型，是指胃黏膜固有腺體出現(xiàn)萎縮，可伴有腸上皮化生及異型增生，帶來嚴重的公共衛(wèi)生及社會問題，嚴重影響患者社會工作能力及生存質(zhì)量。慢性萎縮性胃炎是慢性淺表性胃炎和胃癌之間的“橋梁”，是胃黏膜惡性轉(zhuǎn)變的關鍵階段，通過對慢性萎縮性胃炎機制的深入研究，不僅可以一定程度揭示炎癥導致炎性腫瘤的發(fā)病機理，更能實施針對性預防措施，降低胃癌的發(fā)病率及死亡率。胃萎清是我們臨床治療慢性萎縮性胃炎的經(jīng)驗方，該方由

2、北芪，白術，半枝蓮，莪術，五指毛桃，枳殼組成，共奏健脾理氣，化瘀解毒的功效，以促進臟腑功能恢復，改善患者的臨床癥狀為首務。
　　JAK2/STAT3信號通路和細胞增殖凋亡密切相關，活化的STAT3可以誘導Bcl-2、Bcl-xL基因的表達，從而抑制胃黏膜細胞的凋亡，促進胃黏膜慢性炎癥相關的胃癌發(fā)生，因此抑制JAK2/STAT3信號通路提供了一種防治胃癌發(fā)生的可能。本研究旨在評估胃萎清顆粒治療慢性萎縮性胃炎的臨床有效性及安全性，同時

3、以JAK2/STAT3信號通路為切入點，分析胃萎清對慢性萎縮性胃炎(CAG)大鼠的作用機制，進一步揭示胃萎清改善慢性萎縮性胃炎病理的分子生物學機制。
　　目的:
　　(1)評估胃萎清顆粒治療慢性萎縮性胃炎患者的臨床有效性及安全性。
　　(2)本實驗用MNNG配合饑飽失常建立慢性萎縮性胃炎的大鼠模型，觀察胃萎清顆粒對慢性萎縮性胃炎大鼠一般情況的影響，同時胃萎清對慢性萎縮性胃炎大鼠腺體萎縮、腸上皮化生的治療效果。
　

4、　(3)探討通過觀察JAK2/STAT3信號通路在慢性萎縮性胃炎中的表達情況，探討胃萎清顆粒對JAK2/STAT3信號通路關鍵因子的調(diào)控作用。
　　方法:
　　(1)臨床研究:納入慢性萎縮性胃炎患者，隨機分為胃萎清組和葉酸組，胃萎清組予胃萎清顆粒劑，1次1包，1日3次。葉酸組予葉酸片，1次5mg，1日3次。給藥24周后復查胃鏡及病理，評估組間胃黏膜萎縮、腸化、異型增生、慢性炎癥、活動性的治療前后改變。并且評估組間上腹（胃脘）

5、疼痛、上腹（胃脘）脹悶、上腹（胃脘）堵悶、燒心、反酸、噯氣、食欲減退、食量減少各單項癥狀積分及癥狀總積分的治療前后改變情況。
　　(2)實驗研究:70-80天SPF級SD雄性大鼠94只，體重170-200克，適應性喂養(yǎng)1周后，隨機分為2組，即:空白組，慢性萎縮性胃炎模型組。空白組14只，慢性萎縮性胃炎模型組80只?？瞻捉M給予正常飲食，自由飲水。慢性萎縮性胃炎模型組予180μg/mL的MNNG飲用液自由飲用，結合饑飽失常法復制慢性萎

6、縮性胃炎大鼠模型，連續(xù)造模至第14周，隨機抽取2只慢性萎縮性胃炎模型組老鼠，進行胃黏膜病理形態(tài)組學檢查，兩只大鼠病理結果均顯示為胃黏膜固有腺體萎縮伴腸上皮化生，表明造模成功。造模成功后將慢性萎縮性胃炎模型組隨機分為5組:模型組，胃萎清高劑量組，胃萎清中劑量組，胃萎清低劑量組，葉酸組。正常對照組和模型對照組給予生理鹽水灌胃。胃萎清高、中、低劑量組灌胃給藥濃度分別為15.6g/kg/d、7.8g/kg/d、3.9g/kg/d。葉酸組給藥濃度

7、為1.46mg/kg/d。灌胃容積10ml/kg，每日1次，連續(xù)灌胃10周。實驗結束后取小彎側(cè)胃體一竇交界處胃黏膜，制備胃黏膜上皮組織切片。HE染色法觀察各組大鼠胃黏膜上皮萎縮、腸上皮化生情況。AB-PAS染色法觀察各組大鼠胃黏膜上皮腸上皮化生病變范圍;刮取剩余大鼠胃黏膜，Western Blot法檢測JAK2、STAT3、p-STAT3的表達。RT-PCR法檢測Bcl-2、Bcl-xL的表達。
　　結果:
　　(1)臨床研

8、究:本試驗共入組64例，治療組34例，對照30例。其中2例治療組患者脫落，總共62例患者參與數(shù)據(jù)分析。
　?、俨±矸矫?，胃萎清對慢性炎癥積分改善的效果優(yōu)于葉酸組。
　?、谠谥饕Y狀積分改善方面，治療組在改善上腹（胃脘）疼痛方面效果優(yōu)于對照組，對照組在治療上腹（胃脘）脹滿方面效果優(yōu)于治療組，其它方面積分治療組與對照組對比，差異無統(tǒng)計學意義。
　　(2)實驗研究:
　?、貶E染色顯示模型組胃黏膜腺體大部分萎縮消失，粘

9、膜肌層增厚，間質(zhì)內(nèi)有炎性細胞浸潤，淋巴濾泡形成，可見腸上皮化生。有不同程度的變性或壞死的脫落細胞，粘膜層變薄，腺體細胞排列紊亂，腺體呈囊狀擴張，上皮細胞形態(tài)大小不一，間質(zhì)水腫、充血。胃黏膜全層出現(xiàn)腸上皮化生，可見大量杯狀細胞。葉酸組大鼠胃黏膜呈粉紅色，光澤度差，胃黏膜變薄、皺襞紊亂，見大量炎細胞浸潤。間質(zhì)水腫、充血、炎細胞浸潤，區(qū)域粘膜可見大量腸上皮化生。胃萎清三個劑量組病理介于葉酸與空白組之間，其中以胃萎清高劑量組病理改善最明顯，胃萎

10、清中劑量組次之，胃萎清低劑量組病理改善效果不明顯。AB-PAS染色顯示正常組大鼠胃黏膜上皮無藍色或紫色腸上皮化生灶;模型組出現(xiàn)彌漫性腸上皮化生，胃萎清治療后，則主要集中在胃腔側(cè)的細胞，其中以胃萎清高劑量組和中劑量組改善最明顯，葉酸組改善不明顯;
　?、贘AK2蛋白在模型組的表達最高，其中胃萎清高劑量組和胃萎清中劑量組表達較模型組降低。STAT3蛋白在模型組的表達最高，胃萎清三個劑量組表達較模型組降低，其中高劑量組降低最明顯。p-S

11、TAT3蛋白在模型組的表達最高，胃萎清三個劑量組表達較模型組降低，其中胃萎清高劑量組較模型組降低最明顯。和模型組比較，胃萎清高劑量組Bcl-2 mRNA表達下降，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。和模型組比較，胃萎清高劑量組Bcl-xL mRNA表達下降，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。
　　結論:
　　(1)胃萎清可改善患者病理的慢性炎癥積分。同時胃萎清可改善上腹（胃脘）疼痛。這為胃萎清治療慢性萎縮性胃炎提供臨床證據(jù)。<