ATRA對腎小球硬化大鼠腎小球TRPC6表達的影響.pdf

1、目的:通過檢測全反式維甲酸（ATRA）干預前后腎小球硬化(GS)大鼠腎小球瞬時受體電位陽離子通道蛋白6(TRPC6)的表達變化，探討ATRA對腎小球TRPC6的影響。
　　方法:采用健康8周齡SPF級雄性Wistar大鼠（體重180士20g），隨機分為3組，假手術組(SHO)、模型組(GS)和治療組（ATRA），每組20只。采用左側腎切除加1周后尾靜脈注射阿霉素(5mg/kg)的方法建立大鼠腎小球硬化(GS)模型。術前1天，ATR

2、A組開始給予ATRA灌胃(15mg/kg)，模型組和假手術組給予等量生理鹽水灌胃，每天1次，共12周，于造模12周末處死大鼠。腎臟病理切片采用蘇木精-伊紅染色（HE）和高碘酸-希夫氏染色(PAS)觀察腎臟的形態(tài)學變化，PAS染色計算腎小球硬化指數(GSI)，電鏡下觀察足細胞超微結構形態(tài)學變化。檢測大鼠造模前后的尿蛋白含量，以及血肌酐、尿素氮的含量。免疫組織化學法檢測腎小球TRPC6、TGF-β1和Ⅳ型膠原蛋白(Col-Ⅳ)的表達，逆轉錄

3、-聚合酶鏈反應（RT-PCR）法檢測腎小球TRPC6 mRNA的表達，免疫印跡法(WB)檢測腎小球TRPC6的蛋白表達。
　　結果:
　　1.與SHO組比較，GS組大鼠PAS染色顯示腎小球局灶節(jié)段性硬化，電鏡下腎小球足細胞足突彌漫性融合、消失，GSI指數、尿蛋白含量及血肌酐、尿素氮含量均顯著升高，提示阿霉素致GS大鼠模型成功建立;
　　2.與GS組比較，ATRA組PAS染色顯示大鼠腎小球硬化程度明顯減輕，電鏡下腎小球足

4、突融合、消失的程度明顯減輕，GSI指數、尿蛋白含量、血肌酐、尿素氮含量及均顯著降低;
　　3.與SHO組比較，GS組腎小球TGF-β1、Col-Ⅳ和TRPC6的蛋白表達均顯著升高，TRPC6的mRNA表達顯著升高;
　　4.與GS組比較，ATRA組大鼠腎小球TGF-β1、Col-Ⅳ和TRPC6的蛋白表達均顯著下降，TRPC6的mRNA表達顯著下降;
　　5.相關性分析:腎小球TRPC6的蛋白表達與GSI指數、TGF-β