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文檔簡介
1、目的:探討促紅細(xì)胞生成素(Erythropoietin,EPO)對卵清蛋白誘導(dǎo)的哮喘小鼠氣道重塑模型的影響,為臨床應(yīng)用EPO防治哮喘氣道重塑提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
方法:選擇雌性Balb/c小鼠40只(平均體重20±2g),將小鼠隨機(jī)分為5組:正常對照組A、哮喘模型組B、地塞米松組C、EPO低濃度組D和EPO高濃度組E。各組小鼠(除對照組外)用新鮮配制的200μlPBS溶液[含卵清蛋白(Ovalbumin,OVA)10μg+明礬佐劑(
2、Alum)50μl],于第1、8、15天各腹腔注射1次致敏。激發(fā)急性期哮喘:于第22天起將各組小鼠置于密閉玻璃缸中予2.5%OVA溶液進(jìn)行霧化吸入,1/d/30min連續(xù)7天。激發(fā)慢性期哮喘:于第33天始,3/w/30min,共4周;C組小鼠每次激發(fā)前予地塞米松1mg/kg腹腔注射;D組于每次激發(fā)前背部皮下注射EPO1000IU/kg;E組以同樣方法給予2000IU/kg處理;A組予生理鹽水代替卵清蛋白進(jìn)行腹腔注射及霧化吸入。采集小鼠肺
3、泡灌洗液(BALF),通過ELISA法檢測TGF-β1、VEGF、MCP-1和SDF-1水平;小鼠肺組織病理切片行HE染色和Masson染色,觀察其病理變化。
結(jié)果:1)ELISA結(jié)果:與A組比較,其它各組BALF中TGF-β1、VEGF、MCP-1及SDF-1水平明顯升高(P<0.05),C組與D組較B組明顯降低(P<0.05),E組與B組比較無統(tǒng)計學(xué)意義。2)HE染色:A組小鼠肺組織結(jié)構(gòu)基本正常,B組小鼠小血管周圍明顯水腫
4、,支氣管周圍可見炎性細(xì)胞浸潤、平滑肌細(xì)胞增生并伴有膠原纖維沉積,肺泡間隔增厚。C組小鼠血管周圍輕度水腫,支氣管周圍少量炎性細(xì)胞浸潤,平滑肌層輕度增厚。D組小鼠支氣管周圍及肺泡間隔炎性細(xì)胞浸潤較模型組減少,平滑肌細(xì)胞及膠原纖維增生不明顯。E組與模型組比較無明顯差異。3)Masson染色:A組支氣管及肺泡周圍無明顯膠原纖維沉積,B組氣道周圍及肺泡間隔可見明顯膠原纖維沉積,C組氣道周圍可見少量纖維沉積,EPO低濃度組及EPO高濃度組纖維沉積較
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