血漿長(zhǎng)鏈非編碼RNA作為肝細(xì)胞癌腫瘤標(biāo)志物的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:原發(fā)性肝癌作為世界范圍內(nèi)常見(jiàn)的惡性腫瘤，具有較高的發(fā)病率及致死率。由于缺乏理想的診斷及治療手段，肝癌患者5年生存率較低。最新研究顯示，長(zhǎng)鏈非編碼RNA在肝癌的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移及侵襲等多種生物學(xué)行為中扮演著重要角色。與癌周正常肝組織相比，長(zhǎng)鏈非編碼RNA在肝癌組織中存在表達(dá)失調(diào)并表現(xiàn)出作為新興腫瘤標(biāo)志物的潛力。然而，獲取肝癌組織的侵襲性操作不適用于臨床篩查。故本實(shí)驗(yàn)擬通過(guò)對(duì)肝癌患者血漿中長(zhǎng)鏈非編碼RNA表達(dá)水平的檢測(cè)以評(píng)價(jià)其作為肝癌

2、非侵襲性腫瘤標(biāo)志物的價(jià)值。
　　研究方法:收集肝癌初治患者及對(duì)照組血液標(biāo)本。根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道選擇9種在肝癌組織中表達(dá)失調(diào)的長(zhǎng)鏈非編碼RNA(HOTAIR、MVIH、MALAT1、PVT1、UCA1、URHC、H19、HOTTIP、HEIH)，通過(guò)實(shí)時(shí)定量PCR及delta-Ct方法分別檢測(cè)其在肝癌患者及對(duì)照組血漿中的穩(wěn)定性及相對(duì)表達(dá)水平。篩選出在肝癌患者血漿中表達(dá)失調(diào)的長(zhǎng)鏈非編碼RNA。通過(guò)繪制受試者工作曲線，評(píng)價(jià)目的基因在肝癌診斷中

3、的價(jià)值并與甲胎蛋白作比較。分析目的基因在血漿中的表達(dá)水平與肝癌患者臨床病例特點(diǎn)之間的關(guān)系。
　　研究結(jié)果:在9種肝癌相關(guān)的長(zhǎng)鏈非編碼RNA中有6種可在血漿中被穩(wěn)定檢出，其余3種檢出率較低(PVT1、UCA1、URHC)。與對(duì)照組相比，肝癌患者血漿中MALAT1及HOTTIP的表達(dá)水平存在明顯失調(diào)。其中，MALAT1的表達(dá)水平明顯升高（Mean±SEM:0.5672±0.09358 vs0.02209±0.002799），而HOTT

4、IP的表達(dá)水平則顯著降低(Mean±SEM:0.001717±0.0005370 vs0.1310±0.02573)。分別繪制MALAT1、HOTTIP及甲胎蛋白的受試者工作曲線，結(jié)果顯示:MALAT1的曲線下面積為0.895(95％CI:0.834-0.956)略高于甲胎蛋白(AUC=0.84095％CI:0.749-0.930)，其敏感度及特異度分別為80.52％和86.17％;而HOTTIP的曲線下面積為0.770(95％CI:0

5、.645-0.896)，其敏感度及特異度分別為74.44％和85.14％。當(dāng)MALAT1與HOTTIP聯(lián)合時(shí)，曲線下面積為0.914;兩種目的基因與甲胎蛋白聯(lián)合時(shí)，曲線下面積最大，為0.961。此外，肝癌患者血漿中MALAT1的表達(dá)水平與患者肝內(nèi)病灶單發(fā)或多發(fā)呈顯著相關(guān)，而HOTTIP則與腫瘤大小、門靜脈侵犯、乙肝及丙肝感染明顯相關(guān)。HOTAIR、MVIH、H19及HEIH在肝癌患者及對(duì)照組血漿中的表達(dá)水平無(wú)明顯差異。
　　結(jié)論: