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文檔簡介
1、目的:觀察不同濃度的LPS、NNK對(duì)小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)增殖以及對(duì)細(xì)胞蛋白NF-κB、CUGBP1表達(dá)的影響。
方法:體外分離、純化、擴(kuò)增同種小鼠BMSCs,MTT法檢測炎性刺激因子在不同濃度時(shí)對(duì)小鼠BMSCs增殖的影響;免疫細(xì)胞化學(xué)染色定位檢測NF-κB和CUGBP1在細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)和分布;Western blot定量檢測細(xì)胞蛋白NF-κB和CUGBP1的表達(dá)。
結(jié)果:MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,不同濃度的LP
2、S、NNK和LPS聯(lián)合NNK均能促進(jìn)小鼠BMSCs的增殖,其中LPS12.5μg/ml、NNK10μg/ml、LPS12.5μg/ml聯(lián)合NNK10μg/ml組對(duì)小鼠BMSCs增殖的促進(jìn)作用最為明顯;免疫細(xì)胞化學(xué)染色結(jié)果可見在相同濃度刺激因子孵育不同時(shí)間的條件下BMSCs細(xì)胞蛋白NF-κB和CUGBP1在細(xì)胞內(nèi)表達(dá)的位置不同,在LPS48小時(shí)組中,NF-κB幾乎在所有的細(xì)胞核中成陽性表達(dá),但在LPS24小時(shí)組和LPS96小時(shí)組中NF-κ
3、B在細(xì)胞核表達(dá)較少,主要表達(dá)與細(xì)胞質(zhì)中。當(dāng)經(jīng)過LPS孵育后,CUGBP1在細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核中呈陽性表達(dá),在一些細(xì)胞中主要表達(dá)于細(xì)胞核中。NF-κB在NNK48小時(shí)組的細(xì)胞中主要表達(dá)于細(xì)胞核中,在NNK24小時(shí)組和NNK96小時(shí)組主要表達(dá)于細(xì)胞質(zhì)中。在NNK24小時(shí)組中,CUGBP1主要表達(dá)于細(xì)胞質(zhì)中,但在NNK48小時(shí)組和NNK96小時(shí)組中CUGBP1主要表達(dá)于細(xì)胞核中。在LPS聯(lián)合NNK組內(nèi),在24小時(shí)組和96小時(shí)組中,NF-κB在細(xì)胞
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