彌漫性軸索損傷后大鼠海馬CRMP2和p-CRMP2表達(dá)變化的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：
　　通過免疫熒光、Western Blot，實(shí)時(shí)定量PCR等方法，研究大鼠彌漫性軸索損傷（diffuse axonal injury, DAI）后海馬CRMP2和p-CRMP2的表達(dá)變化。
　　方法：
　　1.使用自主設(shè)計(jì)研制的可同時(shí)產(chǎn)生瞬時(shí)角加速和線加速運(yùn)動(dòng)的致傷裝置（專利號(hào)：ZL200920067463.4）建立DAI大鼠模型。
　　2.利用免疫熒光技術(shù)，定性研究正常對(duì)照組和DAI后7天組大鼠海馬內(nèi)C

2、RMP2和p-CRMP2的表達(dá)。
　　3.利用Western Blot技術(shù)，定量研究正常對(duì)照組和DAI后不同時(shí)間點(diǎn)大鼠海馬內(nèi)CRMP2和p-CRMP2的表達(dá)變化。同時(shí)利用實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)，檢測(cè)上述各組CRMP2的mRNA表達(dá)變化。
　　結(jié)果：
　　1.免疫熒光：CRMP2和p-CRMP2在大鼠海馬組織神經(jīng)元中廣泛表達(dá)。實(shí)驗(yàn)觀察發(fā)現(xiàn)，正常組和DAI后7天組海馬神經(jīng)元中CRMP2和p-CRMP2免疫熒光反應(yīng)陽性，發(fā)出綠色

3、熒光，胞核發(fā)出藍(lán)色熒光。
　　2.Western Blot和實(shí)時(shí)定量PCR：CRMP2和p-CRMP2在DAI后不同時(shí)間點(diǎn)的海馬組織中均有表達(dá)。蛋白水平上：CRMP2在傷后3天、7天的表達(dá)較正常對(duì)照組明顯降低（p＜0.05），但是傷后30天組較正常對(duì)照組無明顯差異。mRNA水平上：CRMP2的mRNA在傷后3天、7天的表達(dá)較正常對(duì)照組明顯降低（p＜0.05），但是傷后30天組較正常對(duì)照組無明顯差異。蛋白水平上：p-CRMP2在傷后