乙酰膽堿調(diào)節(jié)大鼠臍血管張力中鉀、鈣通道的參與及其機(jī)制研究.pdf

1、目的：研究乙酰膽堿（ACh）調(diào)節(jié)大鼠臍靜脈張力變化的相關(guān)機(jī)制及鉀、鈣通道的參與。
　　方法：血管張力實(shí)驗(yàn)檢測(cè)臍帶靜脈環(huán)對(duì)乙酰膽堿的收縮反應(yīng)，孵育特異性阻斷劑闡明乙酰膽堿介導(dǎo)收縮可能的作用途徑。利用鈣成像技術(shù)檢測(cè)乙酰膽堿引起胞內(nèi)鈣濃度的變化。利用膜片鉗技術(shù)檢測(cè)急性分離臍帶靜脈平滑肌全細(xì)胞鉀電流，及乙酰膽堿對(duì)全細(xì)胞鉀電流的調(diào)節(jié)作用。用 RT-PCR的方法檢測(cè)毒蕈堿受體（M受體）各亞型mRNA相對(duì)于β-actin的表達(dá)量。
　　結(jié)

2、果：乙酰膽堿介導(dǎo)臍帶靜脈環(huán)濃度依賴(lài)性（10-12-10-4 mol/L）收縮，且被非選擇性毒蕈堿受體抑制劑阿托品完全阻斷，孵育特異性毒蕈堿受體抑制劑，結(jié)果顯示M1R，M3R而非M2R介導(dǎo)其收縮。鈣成像結(jié)果顯示乙酰膽堿引起胞內(nèi)鈣離子濃度升高，結(jié)合藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)表明內(nèi)鈣和外鈣同時(shí)參與調(diào)節(jié)乙酰膽堿的收縮作用。而鉀通道參與其收縮的負(fù)反饋調(diào)節(jié)，同時(shí)膜片鉗結(jié)果顯示膽堿類(lèi)藥物部分抑制全細(xì)胞鉀電流，從而通過(guò)調(diào)節(jié)膜電位的去極化介導(dǎo)收縮。RT-PCR表明大鼠臍