化濁解毒扶正方抑制荷瘤小鼠H22肝癌細(xì)胞增殖與誘導(dǎo)凋亡作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：通過建立H22移植性肝癌小鼠的動物模型，不同實(shí)驗(yàn)組分別給予化濁解毒扶正方、5Fu及聯(lián)合應(yīng)用的干預(yù)，來對比實(shí)驗(yàn)小鼠的一般狀況、抑瘤率、免疫指數(shù)及腫瘤組織中Fas蛋白、PCNA蛋白表達(dá)的情況，進(jìn)一步探討化濁解毒扶正方抗腫瘤的可能機(jī)制，為化濁解毒扶正方臨床廣泛的應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)。
　　方法：清潔級昆明種健康雄性小鼠50只，按體重隨機(jī)抽取10只作為空白對照組（N），其余40只造模用。無菌條件下，在小鼠右前腋下接種要求濃度的腫瘤細(xì)胞懸

2、液，建立荷H22實(shí)體移植瘤小鼠模型。隨機(jī)將造模小鼠分成4組：依次為模型組（M）、化濁解毒扶正中藥組（Z）、5Fu組（X）、化濁解毒扶正中藥聯(lián)合5Fu組（Z+X），每組10只。造模24小時后每組小鼠給予相應(yīng)的藥物干預(yù)，持續(xù)12天。治療期滿，小鼠禁食不禁水12小時以上，稱量體重并脊髓脫臼法處死。常規(guī)消毒并完整剝離瘤組織、脾臟和胸腺，精密天平稱重，計(jì)算各組小鼠的抑瘤率、胸腺指數(shù)、脾指數(shù)。用10％甲醛液固定剝離下的腫瘤組織，HE染色觀察荷瘤各組

3、腫瘤細(xì)胞的病理變化；免疫組織化學(xué)法測定瘤組織中F as蛋白、PC NA蛋白的表達(dá)水平。
　　結(jié)果：
　　1.各組小鼠一般情況的比較。與 N組小鼠相比，各組荷瘤小鼠均出現(xiàn)不同程度的精神萎靡、反應(yīng)遲緩、喜臥懶動、皮毛枯燥凌亂、進(jìn)食減少等表現(xiàn)，其中M組小鼠的表現(xiàn)最為突出。治療組之間相比，Z+X組的一般狀態(tài)最佳，優(yōu)于其余治療組。Z組與X組相比，Z組小鼠的精神狀態(tài)、體重、靈敏度、活躍程度等一般狀態(tài)均優(yōu)于X組。
　　2.各組小鼠抑

4、制腫瘤生長情況。各治療組相比，Z+X組出現(xiàn)腫瘤的時間最晚，其次為X組、Z組、M組；Z+X組的抑瘤率最高，其次為X組、Z組；各組平均瘤重比較，Z+X組平均瘤重最小，其次為X組、Z組、M組，三個治療組的平均瘤重均小于M組，有顯著性差異；Z+X組下降最明顯，與X組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；Z組與 X組之間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　3.各組小鼠胸腺指數(shù)的比較。與 N組對比，荷瘤各組小鼠的胸腺指數(shù)均有不同程度的下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；荷瘤組之間比較

5、，Z+X組、Z組胸腺指數(shù)均高于X組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而Z+X組、Z組之間差異不顯著；X組、M組之間胸腺指數(shù)也無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　4.各組小鼠脾指數(shù)的比較。與 N組比較，荷瘤各組小鼠的脾指數(shù)均有所下降，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；荷瘤組之間比較來看，Z+X組、Z組脾指數(shù)均高于X組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而二者之間差異不顯著；X組與M組相比，小鼠脾指數(shù)也無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　5.各組小鼠HE染色腫瘤細(xì)胞病理的比較。與M組相比，各治療組HE染色的腫

6、瘤細(xì)胞均出現(xiàn)不同程度的核固縮，分裂相減少，瘤體內(nèi)新生血管減少，壞死細(xì)胞數(shù)增多，浸潤的淋巴細(xì)胞也不同程度增加。其中，Z+X組的變化最為明顯。
　　6.荷瘤各組小鼠腫瘤組織F as蛋白表達(dá)的比較。免疫組化的結(jié)果顯示：與M組比較，各治療組腫瘤組織中F as蛋白的陽性表達(dá)率均有不同程度升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；其中， Z+X組升高最為明顯，與X組、Z組均有顯著差異；而Z組與X組相比來看，二者差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　7.荷瘤各組小鼠腫瘤

7、組織PC NA表達(dá)的比較。免疫組化結(jié)果顯示：與M組相比，治療各組腫瘤組織中PC NA的陽性表達(dá)率均有下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；治療組之間來看，Z+X組下降最為明顯，與Z組、X組均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；而Z組與X組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論：
　　1.化濁解毒扶正方可以明顯改善荷瘤小鼠的一般狀態(tài)、降低瘤重并提高抑瘤率，對小鼠肝癌組織有明顯的抑制作用。
　　2.化濁解毒扶正方能提高荷瘤小鼠的胸腺指數(shù)與脾指數(shù)，提示它對瘤小鼠的免