重組人IL-17D對(duì)上皮性卵巢癌SKOV3細(xì)胞增殖、遷移及VEGF-C表達(dá)的影響.pdf

1、目的：通過(guò)研究重組人IL-17D（r-hIL-17D）對(duì)人上皮性卵巢癌SKOV3細(xì)胞增殖、遷移及VEGF-C表達(dá)的影響，探討IL-17D對(duì)卵巢癌增殖及淋巴轉(zhuǎn)移的作用。
　　方法：
　　1.體外培養(yǎng) SKOV3（人卵巢漿液性乳頭狀腺癌細(xì)胞）并連續(xù)傳代，于倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)。
　　2.取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的SKOV3細(xì)胞，分別以不同濃度（0ng/ml、10 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml） r-hIL-17

2、D作用于細(xì)胞0h、24h、48h、72h、96h、120h，以MTS法檢測(cè)不同濃度r-hIL-17D在不同時(shí)間對(duì)卵巢癌SKOV3細(xì)胞的增殖的影響，并繪制生長(zhǎng)曲線(xiàn)。
　　3.Transwell小室實(shí)驗(yàn)檢測(cè)不同濃度r-hIL-17D(0 ng/ml、10 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml)對(duì)SKOV3細(xì)胞遷移能力的影響。
　　4.分別以不同濃度（0 ng/ml、10 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/m

3、l） r-hIL-17D作用SKOV3細(xì)胞48h后，提取各組細(xì)胞RNA，以RT-qPCR法檢測(cè)不同濃度r-hIL-17D對(duì)SKOV3細(xì)胞VEGF-C mRNA表達(dá)的影響。
　　5.分別以不同濃度（0 ng/ml、10 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml） r-hIL-17D作用 SKOV3細(xì)胞48h后，收集細(xì)胞上清液，ELISA法檢測(cè)上清液中VEGF-C的含量。
　　結(jié)果：
　　1.成功培養(yǎng)并傳代卵巢癌S

4、KOV3細(xì)胞，獲得對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞。
　　2.MTS法顯示：10 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml組SKOV3細(xì)胞增殖速度快于0ng/ml組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），50 ng/ml、100 ng/ml組SKOV3細(xì)胞增殖速度快于10ng/ml組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），50 ng/ml、100 ng/ml組SKOV3細(xì)胞增殖速度無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。
　　3.Transwell小室

5、實(shí)驗(yàn)顯示：在不同濃度IL-17D(0 ng/ml、10 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml)作用下，SKOV3細(xì)胞的遷移數(shù)目分別為118.80±13.66、144.20±12.70、180.80±20.54、176.60±18.15，經(jīng)單因素方差分析，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。兩兩比較，10 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml組SKOV3細(xì)胞的遷移能力強(qiáng)于0 ng/ml組（P＜0.05），50 ng/

6、ml、100 ng/ml組SKOV3細(xì)胞的遷移能力強(qiáng)于10 ng/ml組（P＜0.05），50 ng/ml、100 ng/ml組SKOV3細(xì)胞的遷移能力無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。
　　4.RT-qPCR結(jié)果顯示：在不同濃度r-hIL-17D（0 ng/ml、10 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml）作用下，SKOV3細(xì)胞VEGF-C mRNA相對(duì)表達(dá)量分別為1.00±0.18、1.54±0.22、2.26±0.1

7、8、2.11±0.26，經(jīng)單因素方差分析，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。兩兩比較，10 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml組VEGF-C mRNA表達(dá)量高于0 ng/ml組（P＜0.05）,50 ng/ml、100 ng/ml組VEGF-C mRNA表達(dá)量高于10 ng/ml組細(xì)胞（P＜0.05）。50 ng/ml、100 ng/ml組VEGF-C mRNA表達(dá)量差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。
　　5.ELI

8、SA結(jié)果顯示：不同濃度（0 ng/ml、10 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml）組細(xì)胞上清液中 VEGF-C的含量分別為4095.09±105.25ng/ml、4439.84±133.87 ng/ml、4755.66±64.24 ng/ml、4646.59±111.92 ng/ml，經(jīng)單因素方差分析，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。兩兩比較，10 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml組VEGF-C含量高于0