升陽益胃湯阻斷萎縮性胃炎大鼠細(xì)胞TLR4信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的研究.pdf

1、目的：本課題通過升陽益胃湯對大鼠CAG模型進(jìn)行干預(yù)，觀察該方阻斷萎縮性胃炎大鼠細(xì)胞TLR4信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的效果，研究其治療慢性萎縮性胃炎的作用機(jī)制，為進(jìn)一步開發(fā)有效新藥奠定前期基礎(chǔ)。
　　方法：本課題實(shí)驗(yàn)采用理化因素制模法建立大鼠CAG模型，取SPF級成年Wister大鼠90只，體重200±20g，雌雄各50只，給予其正常喂食三天后，隨機(jī)抽取10只，雌雄各半，作為正?？瞻讓φ战M,余下80只均采用用0.05％氨水、10mmol/L去氧

2、膽酸鈉、30%酒精與2%水楊酸混合液及免疫方法配合饑飽失常建立大鼠CAG模型，連續(xù)10周。于造模第7周隨機(jī)將80只大鼠分為模型組、硫糖鋁對照組、升陽益胃湯低劑量干預(yù)組、升陽益胃湯中劑量干預(yù)組、升陽益胃湯高劑量干預(yù)組、升陽益胃湯低劑量治療組、升陽益胃湯中劑量治療組、升陽益胃湯高劑量治療組，每組10只（雌雄各5只），其中模型組及各劑量治療組只造模，硫糖鋁對照組予以硫糖鋁灌胃，各劑量干預(yù)組則在造模的同時，以不同劑量的升陽益胃湯予干預(yù)治療，經(jīng)過

3、4周造模后，于造模第10周末將模型組中大鼠10只處死取胃組織病檢，確認(rèn)造模成功后，除各劑量治療組外均予處死采集樣本，送檢空白組、模型組、硫糖鋁對照組、低劑量干預(yù)組、中劑量干預(yù)組、高劑量干預(yù)組大鼠的胃黏膜組織，各劑量治療組則在造模成功后，繼續(xù)治療4周后處死，取出胃黏膜組織。對取出的組織采用RT-PCR法及Western-blot法檢測TLR4、MyD88、MAPK、NF-κB、I-κB等指標(biāo)的基因和蛋白的表達(dá)，同時對所得出的結(jié)果進(jìn)行分析，

4、從而判斷升陽益胃湯對大鼠CAG模型胃黏膜組織TLR4信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響。
　　結(jié)果：
　　1、成功建立大鼠CAG模型；
　　2、模型組的各項(xiàng)指標(biāo)的基因表達(dá)和蛋白表達(dá)與空白對照組有明顯的差異，其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01),并伴有大鼠胃黏膜組織萎縮，炎細(xì)胞組織浸潤，少數(shù)甚至還伴有腸上皮化生等癌前病變；
　　3、硫糖鋁對照組與模型組相比，TLR4、MyD88、MAPK、NF-κB、I-κB的基因表達(dá)與蛋白的表達(dá)

5、均有明顯差異（P<0.01）；
　　4、各劑量升陽益胃湯干預(yù)組及治療組的TLR4、MyD88、MAPK、NF-κB基因表達(dá)及蛋白表達(dá)隨著濃度的上升而逐漸下降，且通過前期的實(shí)驗(yàn)觀察及大鼠胃黏膜組織的觀察也可以看出隨著升陽益胃湯的濃度增高，大鼠的整體情況及胃黏膜病理組織學(xué)均有明顯改善；
　　結(jié)論：
　　1、利用理化因素制模法10周可以成功建立大鼠CAG模型；
　　2、 TLR4、MyD88、MAPK、NF-κB、I-