元寶楓油的對(duì)力竭運(yùn)動(dòng)大鼠骨骼肌損傷的影響.pdf

1、目的：本文旨在探索元寶楓油對(duì)力竭運(yùn)動(dòng)大鼠骨骼肌損傷的影響，為元寶楓油作為一種新型抗氧化劑服務(wù)于體育界提供依據(jù)。
　　方法：將元寶楓種仁脫皮后，在凈化式熱風(fēng)循環(huán)烘箱充分烘干，裝入液壓榨油機(jī)榨取元寶楓原油。隨后采用CO2超臨界連續(xù)萃取技術(shù)對(duì)元寶楓原油進(jìn)行萃取，通過設(shè)置單因素實(shí)驗(yàn)，控制萃取溫度、萃取壓力以及CO2流量，測(cè)定萃取效率后，再通過響應(yīng)面優(yōu)化元寶楓油萃取工藝參數(shù)。采用高速逆流色譜技術(shù)測(cè)定元寶楓油中的脂肪酸組成及百分含量。

2、　　選用7周齡SD雄性大鼠，體重270±30g，適應(yīng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)房環(huán)境一周后，將其隨機(jī)分為安靜組（CG）、力竭組(EG)、低劑量元寶楓油力竭組（LG）、中劑量元寶楓油力竭組（MG）、高劑量元寶楓油力竭組（HG），每組8只，雙鼠單籠飼養(yǎng)，自然光照，自由飲水進(jìn)食，室溫25±2℃，國家標(biāo)準(zhǔn)臼齒類動(dòng)物飼料喂養(yǎng)，2-3天更換一次墊料。所有力竭組大鼠每天上午九時(shí)以逐漸加速的方式進(jìn)行15-20分鐘的適應(yīng)性訓(xùn)練，3天后建立為期6周的力竭模型，最后一次跑臺(tái)訓(xùn)

3、練至力竭后用乙醚麻醉對(duì)照組和力竭組的大鼠，腹主動(dòng)脈取血，在冰上將其左腿腓腸肌迅速取下，剪取長、寬0.5cm的組織投入固定液中制備組織切片，將腓腸肌剩余部分迅速投入液氮中速凍30分鐘之后，移入-80℃低溫冰箱中備用。制備血清備用待測(cè)，檢測(cè)血清中CK、LDH活性；腓腸肌制備勻漿后測(cè)定其中MDA、GSH含量，CAT、SOD、GSH-PX、T-AOC活性以及Caspase-8、Caspase-3活性。
　　結(jié)果：
　　1、通過單因素

4、實(shí)驗(yàn)，確定超臨界CO2連續(xù)萃取元寶楓油過程中，萃取溫度、萃取壓力、CO2流量對(duì)萃取效率的影響規(guī)律；以萃取溫度、萃取壓力、CO2流量為自變量，以萃取效率作為響應(yīng)指標(biāo)，運(yùn)用Design Expert7.1.3軟件進(jìn)行Box-Bebnken設(shè)計(jì)優(yōu)化實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，確定最佳工藝條件為：萃取壓力28MPa，萃取溫度37.66℃，CO2流量267.67L/h，萃取率達(dá)到96.23％。
　　元寶楓油中含有脂肪酸的成分及百分比：0.15%棕櫚油酸（C1

5、6H30O2）、4.13%棕櫚酸（C16H32O2）、1.76%亞麻酸（C18H30O2）、35.86%亞油酸（C18H32O2）、26.53%油酸（C18H34O2）、2.6%硬脂酸（C18H32O2）、8.36%11-二十碳烯酸（C20H38O2）、0.22%花生酸（C20H40O2）、13.01%芥酸（C22H42O2）、0.89%山崳酸（C22H44O2）、4.98%神經(jīng)酸（C24H46O2）、0.34%木焦油酸（C24H48O

6、2），不飽和脂肪酸含量達(dá)93.25%。
　　2、力竭運(yùn)動(dòng)即刻，EG組骨骼肌肌膜模糊、肌纖維紊亂且肌核分布不均；與CG組相比，EG組血清CK和LDH活性提高；與CG組相比，EG組骨骼肌中MDA、SOD、CAT、GSH-PX、T-AOC、 Caspase-8以及Caspase-3升高，GSH含量下降。
　　3、元寶楓油干預(yù)力竭運(yùn)動(dòng)大鼠后，LG組骨骼肌損傷較EG組小，但HG組骨骼肌損傷明顯較EG組嚴(yán)重；與CG組相比，LG、MG、H

7、G組CK、LDH活性均升高；與EG組相比， LG組CK、LDH活性降低；MG、HG組CK活性較EG組升高，但LDH活性較EG組降低；與CG和EG組相比，LG組MDH含量降低，但GSH、SOD、CAT、GSH-PX、T-AOC升高；與CG和EG組相比，MG、HG組的MDA含量升高，但GSH、SOD、CAT、GSH-PX、T-AOC降低。與EG組相比，LG、MG、HG組的Caspase-8、Caspase-3活性均降低；與LG與CG組Cas

8、pase-8、Caspase-3活性結(jié)果相近，MG、HG組與EG組相比Caspase-8、Caspase-3活性均降低。
　　結(jié)論：
　　1.響應(yīng)面優(yōu)化CO2超臨界萃取可提高元寶楓油的萃取效率,萃取效率高達(dá)96.23%，其中不飽和酸含量高達(dá)93.25%。
　　2、低劑量元寶楓油可明顯緩解力竭運(yùn)動(dòng)導(dǎo)致的骨骼肌氧化應(yīng)激損傷，表現(xiàn)為改善力竭大鼠骨骼肌的肌纖維排列、肌核分布，降低力竭運(yùn)動(dòng)大鼠血清CK和LDH活性，減少骨骼肌MD