CD44聯(lián)合Prpc作為胃癌干細(xì)胞的初步研究.pdf

1、研究背景:胃癌是世界上特別是東亞非常常見的惡性腫瘤之一。每年的新發(fā)病例和因病死亡病例都是一個(gè)非常高的數(shù)字。隨著醫(yī)學(xué)的進(jìn)步，各項(xiàng)疾病的診療手段不斷的出現(xiàn)。胃癌由于胃鏡和CT等手段的進(jìn)步，越來越多的早期胃癌得到發(fā)現(xiàn)。但由于胃癌的起病隱匿，癥狀不甚明顯，胃鏡等篩查手段在中國難以大面積鋪展開來，很多患者發(fā)現(xiàn)胃癌時(shí)往往以進(jìn)入進(jìn)展期，已經(jīng)發(fā)生侵襲和轉(zhuǎn)移，失去了手術(shù)的最佳機(jī)會(huì)，放化療的效果也不甚理想。而目前的研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤的發(fā)生發(fā)展侵襲和轉(zhuǎn)移都跟腫瘤

2、干細(xì)胞有著千絲萬縷的關(guān)系。為了解開胃癌的奧秘，為了提高胃癌的診斷率和術(shù)后生存率，有必要對胃癌腫瘤干細(xì)胞及其相關(guān)機(jī)制進(jìn)行研究。
　　研究目的:研究CD44和Prpc在胃癌中的分布和表達(dá)情況，分析胃癌與兩種基因在增殖，侵襲轉(zhuǎn)移及預(yù)后方面的關(guān)系。并進(jìn)一步探究其中的分子機(jī)制和信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路。
　　研究方法:
　　1、收集胃癌病例進(jìn)行隨訪。利用組織免疫熒光和免疫組化技術(shù)檢測CD44，Prpc在胃正常粘膜組織中和胃癌組織中的分布和表

3、達(dá)情況。并分析兩種蛋白與胃癌臨床病理之間的關(guān)系。
　　2、應(yīng)用實(shí)時(shí)定量PCR和蛋白免疫印跡技術(shù)篩選CD44和Prpc高表達(dá)的胃癌細(xì)胞系。通過RNA干擾技術(shù)構(gòu)建sh-RNA質(zhì)粒和相應(yīng)的表達(dá)質(zhì)粒，分析沉默Prpc和高表達(dá)對EMT相關(guān)蛋白的影響。通過平板克隆形成實(shí)驗(yàn)觀察Prpc對腫瘤增殖能力的影響。通過Transwell實(shí)驗(yàn)檢測Prpc對胃癌細(xì)胞侵襲和遷徙能力的影響。
　　3、收集胃癌病人和健康人的新鮮血液，采用流式細(xì)胞儀檢測分析

4、CD44和Prpc雙陽性細(xì)胞和單陽性細(xì)胞的比例情況。
　　研究結(jié)果:
　　1、免疫組化和組織免疫熒光顯示:CD44和Prpc在胃癌中的陽性表達(dá)率明顯高于胃正常粘膜組織。CD44和Prpc的表達(dá)同胃癌的浸潤深度，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和腫瘤分期正相關(guān)。
　　2、CD44和Prpc在胃癌細(xì)胞系MGC823中相對表達(dá)量較高。沉默MGC823中的Prpc的表達(dá)可以降低胃癌細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移能力，克隆形成能力，降低N-cadherin的表達(dá)。<

5、br>　　3、胃癌患者中，血液中的CD44和Prpc雙陽性細(xì)胞和單陽性細(xì)胞都較健康人群顯著性增加。
　　研究結(jié)論:
　　1.CD44和Prpc的表達(dá)與胃癌的發(fā)生發(fā)展相關(guān)，可以作為腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移及惡性程度的指標(biāo)，以及未來有可能成為判斷預(yù)后的指標(biāo)。
　　2.抑制Prpc基因的表達(dá)，可以對胃癌細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移，增殖能力進(jìn)行抑制。同時(shí)Prpc的表達(dá)還可以影響EMT相關(guān)蛋白的表達(dá)。
　　3.循環(huán)系統(tǒng)中存在CD44和Prpc